Optimasi Metode Loop-mediated Isothermal Amplifcation (LAMP) untuk Uji Kehalalan Daging Segar.

Abstract

Metode loop-mediated isothermal amplification (LAMP) merupakan alternatif dari metode PCR dengan tingkat sensitifitas yang sama namun menggunakan peralatan yang lebih sederhana. Hal ini penting untuk infrastruktur pengujian halal di berbagai daerah yang mungkin memiliki keterbatasan sumber daya pengujian, khususnya dalam menyongsong kewajiban sertifikasi halal. Penelitian ini bertujuan memperoleh kondisi optimal pengujian LAMP sebagai metode deteksi babi yang sensitif dan sederhana untuk uji kehalalan pangan. Gen sitokrom B dan gen troponin I babi diamplifikasi mengunakan komposisi reagen, proses amplifikasi serta metode deteksi yang bervariasi. Hasil pengujian menunjukkan bahwa reaksi dapat berlangsung dengan tambahan 2 primer loop (loopF dan loopB) dan optimum pada suhu 65 oC selama 45 menit, dilanjutkan suhu 80 oC selama 5 menit. Kedua gen target dapat diamplifikasi dan tidak bereaksi silang dengan spesies lain. Sejauh ini, hanya elektroforesis yang memberikan hasil berbeda antara kontrol positif dan negatif. Meskipun menunjukkan hasil positif, reaksi LAMP memerlukan optimasi lebih lanjut sehingga lebih sensitif dan DNA hasil amplifikasi mampu divisualisasi dengan metode yang lebih sederhana.