Karakterisasi amilase dari isolat bakteri lokal MII 10

Abstract

Pati yang banyak dihasilkan oleh tumbuhan tingkat tinggi, terdiri dari dua komponen yaitu amilosa dan amilopektin. Amilosa merupakan polimer linier dari sekitar 1000 unit D-glukosa dengan ikatan a-1,4 glikosidik dan beberapa percabangan ikatan a-1,6 sedangkan amilopektin memiliki lebih banyak percabangan. Enzim yang mampu menghidrolisis ikatan a-1,4 glikosidik pada pati disebut enzim amilolitik atau amilase (a- amilase, ß-amilase, dan glukoamilase). Amilase tersebut sangat dibutuhkan untuk industri makanan, minuman, dan tekstil. Kebutuhan impor enzim untuk industri di Indonesia pada tahun 1995 mencapai 4.693.400 dolar Amerika (BPS, 1996). Dalam penelitian ini dilakukan karakterisasi amilase kasar yang dihasilkan bakteri isolat lokal MII10 hasil isolasi Balai Penelitian Bioteknologi Tanaman Pangan, Bogor. Karakter-karakter yang dimaksud meliputi kondisi katalitik optimum (pH dan suhu), kestabilan enzim, kinetika enzimatik, bobot molekul, serta sifat dan perilaku inhibisi dan aktivasinya terhadap beberapa senyawa kimia. Bakteri MII10 yang ditumbuhkan pada suhu 38°C menggunakan substrat pati sagu mampu menghasilkan amilase kasar (Amilase MII10) dengan aktivitas sebesar 53860,65 Unit/ml. Satu unit aktivitas amilase didefinisikan sebagai sejumlah enzim yang dapat menghasilkan 1 mmol gula reduksi (standar maltose) per menit. Dari pengujian aktivitas pada pH reaksi 4,0; 5,0, 6,0; 7,0; 8,0 dan 9,0 diketahui bahwa pH optimum Amilase MII, dicapai pada pH 7,0. Sedangkan penentuan suhu reaksi optimum, dilakukan dengan mengukur aktivitas enzim pada suhu reaksi 30°C, 40°C, 50°C, 60°C, dan 70°C. Dari pengujian tersebut diketahui suhu aktivitas optimum Amilase MII10 adalah 50° 60°C. ...