Optimasi Transformasi Genetik Talas Satoimo Menggunakan Gen Oshox4 Berdasarkan Ragam Waktu Ko-Kultivasi dan Optical Density Agrobacterium tumefaciens

Abstract

Satoimo (Colocasia esculenta var. antiquorum) memiliki kandungan gizi yang baik seperti protein, amilosa, tepung dengan sifat lambat untuk dicerna, tiamin, riboflavin, fosfor, magnesium dan besi. Tanaman ini dapat dijadikan sebagai alternatif pangan untuk mendukung penganekaragaman pangan. Tanah marginal yang merupakan jenis tanah dengan kandungan air terbatas diproyeksikan untuk budidaya tanaman ini, sehingga dibutuhkan tanaman yang tahan terhadap cekaman kekeringan. Salah satu gen yang berperan dalam toleransi terhadap cekaman kekeringan adalah gen Oshox4. Oshox4 merupakan gen yang termasuk ke dalam kelompok HD-ZIP 1 (homeodomain-leucine zipper), gen ini memiliki fungsi pengaturan respon tanaman terhadap cekaman kekeringan. Pengintegrasian gen Oshox4 ke dalam genom talas Satoimo melalui transformasi yang dimediasi oleh Agrobacterium tumefaciens diharapkan dapat meningkatkan ketahanan hidup tanaman tersebut pada lingkungan dengan ketersediaan air yang terbatas. Transformasi genetik menggunakan Agrobacterium tumefaciens adalah salah satu metode yang dapat digunakan untuk menghasilkan tanaman unggul dengan sifat tersebut. Tujuan dari penelitian ini adalah mendapatkan kondisi optimal untuk transformasi genetik talas Satoimo yang dimediasi oleh Agrobacterium tumefaciens. Transformasi genetik dilakukan dengan menggunakan vektor biner yang mengandung gen Oshox4 dan gen hpt. Bahan tanaman yang digunakan dalam penelitian ini adalah meristem, akar, daun, tangkai daun dan pangkal batang talas Satoimo. Transformasi dilakukan dengan menggunakan tiga waktu ko-kultivasi yaitu 1, 2, dan 3 hari serta dua optical density A. tumefaciens yaitu 0.5 dan 0.7. Tanaman putatif transgenik diseleksi menggunakan media MS yang mengandung higromisin 10 mg/l. Integrasi gen target dianalisis berdasarkan keberadaan gen Oshox4 dan gen hpt pada genom tanaman putatif transgenik menggunakan teknik PCR. Hasil penelitian menunjukkan bahwa tanaman putatif-transgenik yang berasal dari pangkal batang dapat bertahan hidup pada media seleksi yang mengandung higromisin dan beberapa di antaranya mengandung gen hpt dan Oshox4. Hal ini menunjukkan bahwa gen Oshox4 telah berhasil di integrasikan ke dalam genom talas Satoimo.