Fraksinasi dan Identifikasi Senyawa Bioaktif Teripang Holothuria atra serta Aktivitasnya sebagai Antikanker

Abstract

Teripang merupakan salah satu organisme laut yang banyak digunakan sebagai sumber senyawa bioaktif baru. Senyawa-senyawa ini digunakan sebagai senyawa utama dalam pencarian obat-obatan baru yang berpotensi sebagai antikanker. Holothuria atra adalah salah satu jenis teripang yang mampu menghasilkan senyawa antikanker terhadap sel kanker seperti sel HeLa (kanker rahim) dan sel MCF-7 (kanker payudara). Penelitian ini bertujuan 1) menentukan fraksi aktif teripang (H. atra) yang memiliki aktivitas sebagai antikanker 2) menentukan jenis senyawa aktif yang dihasilkan oleh teripang (Holothuria atra) sebagai antikanker dengan menggunakan Fourier transform infrared (FTIR) dan liquid chromatography mass spectra (LC-MS). Tahapan penelitian ini terdiri atas tahap identifikasi teripang, preparasi dan ekstraksi, fraksinasi dan identifikasi. Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol 96% sehingga diperoleh ekstrak kasar. Ekstrak kasar dipartisi dalam corong pisah dengan pelarut metanol : air : n-heksana : etil asetat (3:1:1:1) sehingga didapatkan fraksi n-heksana, etil asetat dan metanol-air. Fraksi metanol-air dipisahkan menggunakan kolom kromatografi dengan fase diam C18 dan fase gerak air, metanol dan diklorometana. Hasil setiap fraksi diuji aktivitas antikanker dengan metode microculture tetrazolium salt (MTT) dan dianalisis pola pemisahannya menggunakan kromatografi lapis tipis. Fraksi terpilih diidentifikasi gugus fungsi dan massa molekul menggunakan FTIR dan LCMS. Fraksi aktif teripang Holothuria atra yang memiliki aktivitas tertinggi sebagai antikanker adalah fraksi F5 dengan nilai IC50 sebesar 2.83 μg/mL terhadap sel kanker payudara MCF-7. Hasil spektrum FTIR menunjukkan bahwa fraksi F5 adalah senyawa saponin dengan adanya gugus fungsi OH pada bilangan gelombang 3432.9 cm-1; 1066.3 cm-1 (C─O); 1733.3 cm-1 (C═O); 1637.3 cm-1 (C=C); 2951.1 cm-1 dan 2870.3 cm-1 (C─H) alifatik (alkana (CH3, CH2, dan CH)). Saponin yang terdapat pada fraksi F5 merupakan golongan triterpenoid yang terdiri dari senyawa cucumechinol A atau C, philinopgenin B dan holothurin B1 berdasarkan bobot molekul m/z 485.4257, 471.3838 dan m/z 869.5256.