Penghambatan Enteropatogenik Escherichia Coli (Epec) K11 Oleh Plantarisin E Rekombinan Dengan Perlakuan Edta

Abstract

Bakteri Enteropatogenik Eschericia coli (EPEC) tergolong dalam bakteri gram negatif termasuk salah satu penyebab penyakit diare. Pengobatan secara umum dilakukan menggunakan antibiotik, namun EPEC K11 mengalami resitensi antibiotik sehingga diperlukan alternatif pengobatan lain. Salah satu alternatifnya adalah peptida antimikroba dari golongan bakteriosin dihasilkan oleh Lactococcus lactis pNZ 8148 Pln E, yaitu plantarisin E rekombinan. Aktivitas antimikroba plantarisin terhadap bakteri gram negatif dapat ditingkatkan dengan penambahan agen pengkelat seperti EDTA. Penelitian ini bertujuan menguji potensi antimikroba plantarisin E rekombinan terhadap penghambatan EPEC K11 dengan penambahan EDTA. Metode yang dilakukan meliputi produksi plantarisin dengan menumbuhkan Lactococcus lactis pNZ 8148 Pln E pada media M17 glukosa. Uji aktivitas plantarisin dilakukan secara kualitatif berdasarkan metode difusi agar. Purifikasi plantarisin menggunakan amonium sulfat dan kolom SP Sepharose. Plantarisin hasil purifikasi ditambahkan EDTA sebanyak 1% v/v dengan berbagai macam konsentrasi dari 1 mM, 5 mM, 10 mM dan 20 mM. Hasil produksi plantarisin diperoleh 200 ml supernatan bebas sel. Hasil purifikasi dengan kolom SP Sepharose menunjukan aktivitas plantarisin sebesar 28.62 AU/mg dengan kandungan total protein sebesar 3.93 mg. Penurunan aktivitas plantarisin akibat pemurnian sebesar 56.25 %. Hasil SDS PAGE menunjukan bobot molekul plantarisin E adalah 3.7 kDa. Perlakuan penambahan EDTA memperlihatkan peningkatan aktivitas penghambatan sebesar 0.5 hingga 4 mm.