Selection of Probiotics Candidate Bacteria to Inhibiting Non-hemolytic Type Streptococcus agalactiae Pathogen on Tilapia Oreochromis niloticus by In Vitro and In Vivo Experiments

Abstract

Non-hemolytic type Streptococcus agalactiae is one of pathogenic bacterial strains causing the Streptococcosis in Tilapia. One of alternative Streptococcosis control is using probiotics bacteria. This research aimed to isolate and to select candidate bacteria as well as to evaluate their antagonistic capability against non-hemolytic type S. agalactiae. In vitro antagonistic test by co-culture of S. agalactiae StR with 10 isolates of probiotics candidate and control with two replications; in vivo antagonistic test by co-injection method of non-hemolytic type S. agalactiae and a isolate of chosen probiotic candidate. The treatments applied including preventing simulation (A), co-injection (B), curative simulation (C), negative control (D), and positive control (E) each with three replications. All data analyzed statistically by one-way ANOVA. Based on in vitro test, isolate L1k showed the best antagonistic activity and showed as nonpathogenic to Tilapia. Observation results of in vivo test showed that the highest survival rate (SR) showed by treatment D (90,0±10,0 %) and significantly different (P<0,05) compared to those of other treatments. Treatment C showed the SR 43,3±15,3 % and not significantly different to that of treatment A (33,3±11,5 %) and E (26,7±5,8 %), but significantly different to that of treatment B (20,0±10,0 %). Clinical symptoms descriptively were not significantly different between treatments injected by non-hemolytic type S. agalactiae, but significantly different with negative control. Feed consumption decreased in fish injected by non-hemolytic type S. agalactiae, although control was normal. Fish haematology did not show significantly different (P>0,05) at all treatments.

Streptococcus agalactiae tipe non-hemolitik merupakan salah satu strain bakteri patogen penyebab penyakit Streptococcosis yang menyerang ikan nila. Salah satu alternatif pengendalian penyakit Streptococcosis yang dapat dilakukan adalah menggunakan bakteri probiotik. Penelitian ini bertujuan mengisolasi bakteri kandidat probiotik dari media budidaya dan usus berbagai jenis ikan air tawar serta menguji kemampuan antagonistik kandidat tersebut terhadap S. agalactiae tipe non-hemolitik. Rancangan penelitian yang digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL) yaitu uji antagonitik in vitro dengan metode kultur bersama S. agalactiae StR dengan 10 isolat kandidat probiotik dan kontrol dengan dua ulangan; serta uji antagonistik in vivo dengan metode injeksi bersama S. agalactiae tipe non-hemolitik dan satu isolat kandidat probiotik terpilih dengan perlakuan simulasi pencegahan (A), injeksi bersama (B), simulasi pengobatan (C), kontrol negatif (D), dan kontrol positif (E) dengan tiga ulangan. Berdasarkan hasil uji in vitro, isolat L1k menunjukkan aktivitas antagonis terbaik dan terbukti tidak patogen terhadap ikan nila. Hasil pengamatan pada uji in vivo menunjukkan bahwa tingkat kelangsungan hidup (SR) perlakuan D paling tinggi (90,0±10,0 %) dibandingkan perlakuan lainnya (P<0,05). Perlakuan C mampu mempertahankan SR sebesar 43,3±15,3 % tidak berbeda nyata dengan perlakuan A (33,3±11,5 %) dan E (26,7±5,8 %), namun berbeda nyata terhadap perlakuan B (20,0±10,0 %). Gejala klinis secara deskriptif tidak berbeda antar perlakuan yang diinjeksi dengan S. agalactiae tipe non-hemolitik, namun berbeda dengan kontrol negatif. Konsumsi pakan terjadi penurunan pada ikan yang diinjeksi dengan S. agalactiae tipe non-hemolitik, sedangkan konsumsi pakan pada kontrol negatif normal. Hematologi ikan tidak menunjukkan perbedaan yang signifikan (P>0,05) pada semua perlakuan.