Isolasi dan Kloning Gen Penyandi Glukanase (GLN) dari Trichoderma sp. pada Vektor Donor dan Vektor Ekspresi
Isolation and Cloning Glucanase Encoding Gene (GLN) from Trichoderma sp. in donor and expression vectors
View/ Open
Date
2011Author
Purnamasari, Riska Ayu
Suryani
Chaidamsari, Tetty
Metadata
Show full item recordAbstract
Palm Oil (Elaeis guineensis Jacq.) is one of the plantations that have an important role for national and world economy. In the production process, there are several obstacles that can decrease production level of palm oil. One of the obstacles is the presence of basal stem rot (BSR) disease that caused by Ganoderma boninense. Basal stem rot disease is the most destructive disease in palm oil. The effect of pathogen can be solve with utilization of glucanase enzyme from Trichoderma sp. Isolation and cloning of glucanase encoding gene was expected to be a solution to against BSR disease in palm oil. The objectives of this research are to isolate and insert the glucanase encoding gene (GLN) inside donor and expression vectors with Gateway cloning technique. After the isolation and amplification process, the 1700 bp of GLN gene insert to the vectors then transformed into Escherichia coli. The result of GLN gene insertion into donor vector was carried out using PCR colony technique and plasmid isolation which resulted DNA band of 6461 bp. And then, the result of GLN gene insertion into expression vector was carried out using PCR colony technique and plasmid isolation which resulted DNA band of 4700 bp. The conclusion of this research was that the fulllength of GLN gene had been successfully isolated and inserted into the donor and expression vectors. Kelapa Sawit (Elaeis guineensis Jacq.) merupakan tanaman perkebunan yang berperan penting dalam perekonomian Indonesia dan dunia. Dalam proses budidaya tanaman ini terdapat beberapa hambatan yang menurunkan tingkat produksinya. Salah satu hambatan yakni adanya penyakit busuk pangkal batang (BPB) yang disebabkan oleh jamur patogen Ganoderma boninense Pat. Penyakit BPB merupakan penyakit yang paling mematikan pada kelapa sawit. Adapun pengaruh patogenitas jamur G. boninense dapat ditanggulagi dengan memanfaatkan enzim glukanase yang berasal dari jamur Trichoderma sp. Isolasi dan kloning gen penyandi glukanase diharapkan menjadi solusi dalam menanggulangi penyakit BPB pada kelapa sawit. Penelitian ini bertujuan mengisolasi dan menyisipkan gen penyandi glukanase (GLN) pada vektor donor dan vektor ekspresi dengan teknik kloning Gateway untuk tujuan perbanyakan gen. Setelah proses isolasi dan amplifikasi, gen GLN yang berukuran 1700 bp disisipkan dalam vektor kemudian ditransformasikan ke dalam Escherichia coli. Hasil penyisipan gen GLN pada vektor donor yang diuji dengan teknik PCR koloni dan isolasi plasmid menghasilkan pita DNA berukuran 6461 bp. Sedangkan hasil penyisipan gen GLN pada vektor ekspresi yang diuji dengan teknik PCR koloni dan isolasi plasmid menghasilkan pita DNA berukuran 4700 bp. Dengan demikian, dapat disimpulkan bahwa gen GLN telah berhasil diisolasi dan disisipkan ke dalam vektor donor dan vektor ekspresi.
Collections
- UT - Biochemistry [1328]