Konstruksi Mutan Pseudomonas sp. CRB17 untuk Meningkatkan Produksi Asam Indol Asetat melalui Mutagenesis dengan Transposon

Abstract

Banyak bakteri yang hidup di rizosfer yang berperan sebagai pemacu pertumbuhan tanaman (plant growth promoting rhizobacteria, PGPR). Salah satu di antaranya yaitu Pseudomonas sp. Hasil isolasi dari tanah rizosfer kedelai didapatkan 100 isolat yang dikategorikan Pseudomonas sp. Salah satu isolat yaitu Pseudomonas sp. CRB17 menghasilkan asam indol asetat (IAA) tertinggi, yaitu sebesar 16.02 ppm. Untuk meningkatkan produksi IAA yang dihasilkan, dilakukan mutagenesis dengan transposon menggunakan Escherichia coli S17-1 (ë pir) pembawa transposon miniTn5Km1 (pUTmini-Tn5Km1) sebagai donor dan Pseudomonas sp. CRB17 sebagai resipien. Frekuensi konjugasi diperoleh berkisar 3.1 x 10-5 sel per resipien pada konjugasi selama 24 jam. Sebanyak 49 mutan telah dianalisis produksi IAA yang dihasilkannya. Mutan-mutan tersebut menghasilkan IAA dengan jumlah yang bervariasi mulai dari yang mengalami penurunan IAA hingga 55.31 %, yang mengalami peningkatan produksi IAA hingga 77.52 %, dan sisanya menghasilkan IAA yang moderat. Dari hasil penelitian ini, mutagenesis dengan transposon dapat digunakan untuk meningkatkan produksi IAA khususnya pada Pseudomonas sp. CRB 17.