Pertumbuhan dan aktifitas ekstrak kasar hyaluronidase streptokokus grup B streptococcus agalactiae isolat manusia pada berbagai pH

Abstract

Streptokokus Grup B (SGB) adalah bakteri gram positif yang dapat menyebabkan beberapa penyakit serius yaitu, pneumonia, septicemia, dan meningitis neonatal. Kemampuan SGB sebagai penyebab penyakit berkaitan erat dengan faktor virulensi yang dimiliki SGB yaitu adanya aktifitas hyaluronidase. SGB SV14 diisolasi dari swab vagina penderita komplikasi obstetri yang aktifitas hyaluronidasenya belum diketahui. Koloni SGB ditumbuhkan dalam media THB (Todd Hewit Broth) pada pH 4, pH 7, dan pH 9 pada suhu 37 °C, diukur fase pertumbuhannya pada 2. 650 nm, dilakukan pengukuran kadar protein dengan metode Bradford (1976), dan uji aktifitas hyaluronidase dengan metode Bergmeyer (1987). Hasil pengukuran fase pertumbuhan setiap jam selama 42 jam tidak menunjukkan hasil yang baik pada pH 4 dan pH 9 pada suhu 37 °C. Fase pertumbuhan yang diukur setiap jam tersebut menunjukkan nilai optical density 0.1, sedangkan isolat SGB SV14 menunjukkan pertumbuhan yang baik pada media THB pH 7 pada suhu 37 °C, dimana SGB mengalami fase pertumbuhan awal pada jam ke-0 sampai jam ke-3, fase pertumbuhan yang pesat pada jam ke-5 sampai jam ke-34, dan fase kematian setelah jam ke-34. Ekskresi hyaluronidase terjadi mulai jam ke-7.5 yang ditandai dengan adanya aktifitas hyaluronidase sebesar 0.0015 U/ml. Hyaluronidase mencapai aktifitas spesifik optimum pada jam ke-20 waktu pertumbuhan pada pH 7 dengan nilai aktifitas spesifik adalah 0.0014 U/mg. Ekstrak kasar yang mempunyai aktifitas spesifik hyaluronidase yang optimum pada jam ke-20 waktu pertumbuhan, diuji pada buffer phospat 10 macam pH. Pada pengujian aktifitas tersebut, hyaluronidase menunjukkan aktifitas optimum pada pH 6.4 sebesar 0.0075 U/ml.