Analisis aktivitas siklodekstrin glukanotransferasi dan sintesis polifenol-@ glikosida secara enzimatik

Abstract

Senyawa polifenol-a-glikosida telah dimanfaatkan sebagai agen yang efektif pada proses-proses biologi. Sintesis senyawa polifenol-a-glikosida dengan menggunakan enzim siklodekstrin glukano- transferase (CGTase) belum diteliti secara eksploratif. Polifenol-a-glikosida dapat disintesis oleh CGTase dengan menggunakan akseptor senyawa polifenol. Dalam penelitian ini dilakukan analisis terhadap aktivitas CGTase lima biakan yang disolasi dari kacang kedelai steril yang difermentasi secara alami dengan jerami padi yang masih segar, yaitu JI₂, JII, JIMI₂, JIII, dan JIII,, dan sintesis polifenol-a-glikosida. Pengujian aktivitas CGTase menggunakan metode Masataka et al. (1993), sintesis dan pemisahan produk transfer dengan menggunakan metode Sulistyo et al. (1994). Pengujian gula total pada tiap fraksi hasil elusi dengan kolom arang aktif dianalisis dengan menggunakan metode Dubois (1956). Kelima biakan yang diisolasi dari jerami yang mengandung kacang kedelai menunjukkan aktivitas CGTase, tetapi hanya isolat JI₂, JII, dan III, yang menunjukkan aktivitas transfer pada akseptor hidrokinon, resolsinol dan piroketekol. Hasil identifikasi sampai tingkat spesies menunjukkan bahwa isolat JI, adalah Bacillus subtilis dan isolat JII, adalah Bacillus megaterium, sedangkan isolat JII, hanya teridentifikasi sampai tingkat genus yaitu Bacillus. Hasil pemisahan dengan kolom arang aktif, menunjukkan bahwa produk transfer terelusi ke luar pada etanol 10%. Produk transfer yang dibentuk dari 2.5 gr pati dan 1gr hidrokinon sebesar 0.74 mg (0.03%). Produk transfer yang diinginkan belum murni, karena masih tercampur beberapa senyawa turunan anilin lainnya dengan berat molekul yang lebih kecil. Oleh karena itu fraksi yang mengandung produk transfer masih perlu dimurnikan lebih lanjut.