Penambatan Molekuler dan Studi In Vitro Senyawa Bioaktif Ekstrak dan Fraksi Daun Sirih Merah (Piper crocatum) sebagai Inhibitor -Glukosidase.

Abstract

Tren peningkatan DM tipe 2 ini telah menjadi masalah medis serius di seluruh dunia yang mendorong setiap upaya dalam mengeksplorasi agen terapi baru. DM tipe 2, penghambatan terapi α-glukosidase bermanfaat untuk menunda penyerapan glukosa setelah makan. Enzim α-glukosidase adalah enzim yang berperan dalam pemecahan karbohidrat menjadi glukosa dan dapat meningkatkan kadar glukosa darah, sehingga untuk mencegah naiknya gula darah maka dibutuhkan suatu inhibitor enzim α-glukosidase. Daun sirih merah digunakan secara turun menurun oleh masyarakat Indonesia dan dipercaya dapat menurunkan kadar glukosa darah. Penelitian sebelumnya berhasil mengisolasi senyawa bioaktif yang terkandung di dalam daun sirih merah, mengandung delapan senyawa aktif, selanjutnya senyawa tersebut dilihat interaksi molekuler dengan enzim α-glukosidase secara in silico kemudian dibuktikan secara in vitro. Penelitian ini bertujuan untuk mempelajari interaksi molekuler antara senyawa bioaktif daun sirih merah terhadap enzim α-glukosidase secara in silico serta menentukan tipe penghambatan ekstrak dan fraksi daun sirih merah terhadap enzim α-glukosidase secara in vitro. Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi menggunakan etanol 70%, kemudian ekstrak difraksinasi bertingkat menggunakan 3 jenis pelarut, yaitu n-heksana, etil asetat dan air. Penambatan molekuler senyawa bioaktif yang diisolasi dari daun sirih merah (Piper crocatum) dengan enzim α-glukosidase menggunakan autodock vina, diperoleh nilai binding affinity dan Ki. Hasil pengujian secara in silico kemudian dibuktikan secara in vitro untuk menentukan aktivitas penghambatan daun sirih merah terhadap enzim α-glukosidase dan menentukan tipe penghambatan dengan persamaan Dixon menggunakan dua konsentrasi substrat (10 mM dan 15 mM). Hasil uji in silico menunjukkan bahwa senyawa aktif yang berperan dalam menghambat enzim α-glukosidase adalah Columbin. Columbin berikatan di situs pengikatan dengan asam amino Ser240, Asp242, His280, Arg315, Glu411, Phe159, Arg442, Tyr158 dan Phe303. Hasil in vitro menunjukkan nilai IC50 terbaik diperoleh untuk fraksi etil asetat pada konsentrasi 743.80 μg/mL, dengan mekanisme penghambatan kompetitif. Berdasarkan hasil pengujian secara in silico maupun in vitro menunjukkan hasil yang serupa, dimana tipe penghambatan daun sirih merah kompetitif dengan senyawa yang diduga berperan sebagai inhibitor adalah columbin.