Viabilitas Embrio Mencit (Mus musculus albinus) setelah Kriopreservasi dengan Metode Vitrifikasi.

Abstract

Vitrifikasi merupakan salah satu metode yang digunakan secara luas sekarang ini sebagai cara untuk menyimpan embrio. Mencit betina disuperovulasi dengan penyuntikkan pregnant mare’s serum gonadotropin (PMSG) dan human chorionic gonadotropin (hCG) kemudian dikawinkan dengan mencit jantan. Koleksi embrio dilakukan pada hari ke-3 (H-3) dan hari ke-5 (H-5). Embrio kemudian divitrifikasi menggunakan media vitrifikasi yang terdiri dari etilen glikol 15% + DMSO 15% + sukrosa 0.5 M + PBS. Setelah vitrifikasi, warming embrio dilakukan dengan menggunakan metode tahapan bertingkat. Embrio dimasukkan ke dalam PBS + sukrosa 0.5 M, 0.25 M, dan 0.1 M. Morfologi dan survival rate embrio dievaluasi setelah warming, dilanjutkan dengan pewarnaan Hoechst-PI untuk mengevaluasi viabilitas lebih lanjut. Hasilnya dibandingkan dengan embrio yang tidak divitrifikasi sebagai kontrol. Tidak terlihat perubahan morfologi yang signifikan antara embrio yang divitrifikasi dan yang tidak divitrifikasi. Tidak terlihat perbedaan antara jumlah total sel dan sel hidup (p>0.05) pada embrio yang divitrifikasi dan tidak divitrifikasi untuk embrio H-3 dan H-5. Persentase dari jumlah total sel dan sel hidup dari embrio yang tidak divitrifikasi lebih besar dibandingkan dengan embrio vitrifikasi. Embrio H-5 memiliki persentase sel hidup yang tidak berbeda nyata (p>0.05) dengan embrio H-3. Hasil menunjukkan bahwa embrio yang tidak divitrifikasi memiliki viabilitas yang sama dengan embrio vitrifikasi dan embrio H-3 memiliki viabilitas yang sama dengan embrio H-5.