Profil Metabolit dan Kapasitas Antioksidan Pegagan (Centella asiatica) dari Lokasi Tumbuh Berbeda

Abstract

Centella asiatica, atau dikenal di Indonesia sebagai pegagan, telah banyak digunakan sebagai obat tradisional dan dikonsumsi sebagai salad dan minuman di beberapa negara. Tanaman ini menunjukkan beberapa aktivitas biologis salah satunya ialah antioksidan. Perbedaan lokasi tumbuh dapat memengaruhi komposisi dan konsentrasi metabolit tanaman yang dapat dievaluasi menggunakan analisis metabolomik. Penelitian ini bertujuan untuk mengidentifikasi perbedaan profil metabolit dari enam lokasi tumbuh dan mengevaluasi kapasitas antioksidannya. Daun pegagan dikumpulkan dari 6 lokasi di pulau Jawa yaitu Karanganyar, Bandung Barat, Kulon Progo, Cianjur, Tegal, dan Batu. Ekstraksi pegagan dilakukan menggunakan metode maserasi dengan pelarut etanol 70%. Kapasitas antioksidan dianalisis menggunakan dua metode, yaitu 2,2-diphenil-1-pikrilhidrazil (DPPH) dan cupri creducing antioxidant capacity (CUPRAC). Selain itu, juga ditentukan kandungan fenolik total (TPC) dan kandungan flavonoid total (TFC). Pemisahan dan identifikasi metabolit dilakukan analisis dengan LC-MS/MS. Proses pemisahan dilakukan menggunakan kolom Accucore C18. Sumber ionisasi yang digunakan adalah ionisasi elektrospray (ESI) dengan metode positif dan negatif dengan penganalisis massa Q-Orbitrap. Sampel dianalisis menggunakan dua fase gerak, yaitu 0,1% asam format dalam asetonitril (A) dan 0,1% asam format dalam air (B). Data yang diperoleh dianalisis menggunakan principal component analysis (PCA), untuk mengelompokkan ekstrak berdasarkan lokasi tumbuh pegagan. Korelasi Pearson digunakan untuk melihat korelasi antara kandungan fenolik, flavonoid, dan aktivitas antioksidan. Ekstrak pegagan dari daerah Batu menunjukkan kapasitas antioksidan tertinggi pada kedua metode DPPH dan CUPRAC yaitu 0,267±0,04 dan 0,662±0,09 mmolTrolox/g. Nilai TPC dan TFC tertinggi juga dihasilkan dari daerah Batu yaitu 126,108±1,33 mgGAE/g ekstrak dan 42,955±3,50 mgQE/gekstrak. Principal component analysis (PCA) berhasil mengklasifikasikan sampel berdasarkan lokasi tumbuh berbeda, dengan variabilitas data 76,1%. Korelasi Pearson menunjukkan korelasi positif antara TPC dan kapasitas antioksidan pada metode DPPH dan CUPRAC. Profil metabolit pegagan menggunakan LC-MS/MS mengidentifikasi secara putatif sebanyak 37 metabolit yang terdiri atas 8 metabolit golongan terpena, 9 metabolit golongan fenolik, 5 metabolit golongan flavonoid, 3 metabolit golongan asam lemak, 6 metabolit golongan asam amino, dan 6 metabolit golongan lainnya. Pegagan dari lokasi yang berbeda dapat dikelompokkan menggunakan intensitas puncak metabolit yang diidentifikasi dengan LC-MS/MS menggunakan PCA. Korelasi Pearson antara metabolit menunjukkan korelasi positif terhadap aktivitas antioksidan. Metabolit yang berkorelasi positif ialah senyawa fenol seperti asam neoklorogenat dan asam 4,5-dikafeoilkuinat. Sehingga, perbedaan lokasi tumbuh dapat memengaruhi konsentrasi metabolit dan tingkat kapasitas antioksidan pegagan.