Efektifitas metode cryoloop dalam vitrifikasi Blastosis mencit (Mus Musculus Albinus)

Abstract

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kelangsungan hidup dan viabilitas blastosis mencit setelah vitrifikasi dengan metode cryoloop. Blastosis diperoleh melalui superovulasi menggunakan hormon pregnant mare serum gonadotropin (PMSG) yang diikuti dengan penyuntikan hormon human chorionic gonadotropin (hCG) 48 jam sesudahnya. Blastosis hasil koleksi pada kebuntingan empat hari (H-4) divitrifikasi dengan memapar dalam media ekuilibrasi (DPBS; dulbecco's phosphat buffered saline + serum 20% + etilen glikol 10%) selama 10-14 menit, dilanjutkan dengan pemaparan dalam media vitrifikasi yang terdiri atas DPBS + serum 20% + sukrosa 0.5M + etilen glikol 15%+ dimetilsulfoxside (DMSO) 15% selama 25-30 detik. Cryoloop dicelupkan dalam media vitrifikasi sehingga terbentuk lapisan tipis, sebanyak 5-10 embrio diteteskan pada lapisan tipis tersebut dan langsung dimasukkan ke dalam liquid nitrogen (LN2 -196 °C). Proses penghangatan (warming) dilakukan pada media rehidrasi (DPBS + serum 20% + larutan sukrosa bertingkat yaitu 0.5M, 0.25M, 0.1M) selama 5 menit. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ketahanan hidup blastosis setelah vitrifikasi mencapai 82.89% setelah 3 jam kultur pada media kalium simplex optimized medium (KSOM), hasil ini tidak berbeda (P>0.05) terhadap kontrol (97.43%). Pengamatan pada 48 jam kultur menunjukkan bahwa tingkat hatched blastosis setelah vitrifikasi (30.38%) juga tidak berbeda (P>0.05) terhadap kontrol (46.51%). Hasil penelitian menunjukan bahwa metode cryoloop dapat digunakan sebagai carrier dalam vitrifikasi blastosis mencit dengan hasil yang memuaskan.