Pembuatan kultur sel primer(Primary cell culture) dari ekor dan otak ikan koi(Cyprinus carpio Linn)

Abstract

Koi Herpes Virus (KHV) adalah penyebab wabah kematian masal pada ikan koi dan ikan mas (Cyprinus carpio) yang terjadi di Indonesia sejak tahun 2002. Sampai saat ini, belum ada kultur sel yang dibuat dari ikan lokal Indonesia. Tujuan penelitian ini adalah untuk membuat kultur sel primer (Primary Cell Culture) dari otak dan ekor ikan koi. Kultur sel primer ini diharapkan dapat digunakan untuk mengisolasi, menumbuhkan dan studi virus lebih lanjut. Kultur sel dibuat dengan teknik tripsinasi dan ditumbuhkan dalam media Leibovitz L-15 yang ditambah dengan FBS 10%, Penicillin 250 IU, Streptomycin 250 µg/ml, Kanamycin 250 µg/ml dan L-glutamin 200 mM. Dua jenis kultur sel primer berhasil dibuat dari otak yang selanjutkan disebut Koi Brain (KB-1 & KB-2) dan dari ekor, Koi Tail (KT-1 & KT-2). KB-1 hanya tumbuh selama 10 hari dengan konfluensi 5%. KB-2 bertahan hidup dalam waktu 45 hari dengan konfluensi 30 %. KT-1 hanya dapat tumbuh sampai pasase ke-3 dan KT-2 menunjukkan pertumbuhan yang cukup baik, mencapai konfluensi 100% dalam 2 minggu dan sudah berhasil dipasase sampai 11 kali. Pasase hanya dilakukan bila konfluensi sudah mencapai 80%. KT-2 merupakan sel fibroblast yang tumbuh seragam. Saat ini KT-2 sudah diperbanyak dan sedang digunakan untuk proses isolasi virus KHV dari ikan koi dan ikan mas.