Kultur in vitro sel-sel fibroblas fetus tikus

Abstract

Penelitian yang dilakukan berupa kultur in vitro sel-sel fibroblas fetus tikus menggunakan Dulbeccos’ Modified Eagle Medium yang dimodifikasi dengan penambahan 3mM natrium bikarbonat, 10% fetal calf serum, dan 50 μg/ml gentamisin (mDMEM) di dalam inkubator CO2 pada suhu 37ºC. Evaluasi dilakukan terhadap tingkat proliferasi dan produksi protein setelah beberapa pasase. Pertumbuhan sel-sel fibroblas diidentifikasi melalui pengamatan morfologi. Tingkat proliferasi sel ditentukan berdasarkan population doubling time (PDT) dengan menghitung jumlah sel pada setiap pasase menggunakan hemositometer Improved Neubauer. Identifikasi protein dilakukan dengan metode Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis (SDS-PAGE). Berdasarkan pengamatan morfologi, sel yang berkembang di dalam kultur in vitro adalah sel fibrosit dan sel fibroblas dan memperlihatkan peningkatan homogenitas setelah beberapa pasase. Berdasarkan nilai PDT, tingkat proliferasi sel juga meningkat seiring pasase. Sel fibroblas juga tetap mensekresikan protein hingga pasase 9 berdasarkan hasil elektroforesis. Dengan demikian dapat disimpulkan bahwa pertumbuhan dan sekresi protein dari kultur in vitro sel-sel fibroblas bisa dipertahankan sampai 9 pasase.