Karakterisasi dan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Pigmen Aktinobakteri.

Abstract

Aktinobakteri adalah bakteri Gram-positif yang berasal dalam filum Actinobacteria. Aktinobakteri adalah sumber metabolit sekunder yang menjanjikan. Salah satu metabolit sekunder yang dihasilkan aktinobakteri adalah pigmen. Berbagai aktinobakteri mampu menghasilkan beragam jenis pigmen, diantaranya yaitu pigmen berwarna kuning hingga oranye. Pigmen memiliki berbagai aktivitas farmakologi seperti antioksidan. Antioksidan adalah molekul yang menghambat atau menunda kerusakan sel dengan menyumbangkan elektron ke radikal bebas dan menstabilkannya. Pigmen yang dihasilkan oleh bakteri memiliki kapasitas antioksidan dan melindungi bakteri dari kerusakan oksidatif. Penelitian aktivitas antioksidan aktinobakteri berpigmen di Indonesia belum banyak dilaporkan, sehingga penelitian aktivitas antioksidan aktinobakteri berpigmen perlu dilakukan. Penelitian ini bertujuan untuk mengkarakterisasi aktinobakteri berpigmen kuning hingga oranye, menguji aktivitas antioksidan dari ekstrak pigmen antinobakteri,serta menganalisissenyawa dari ekstrak pigmen yang memiliki aktivitas antioksidan tertinggi. Isolat aktinobakteri diisolasi dari rizosfer mangrove di Pantai Cengkrong Trenggalek,sampel tanah merah di kebun area kampusIPB, dan isolat aktinobakteri endofit dari kulit manggis yang telah diidentifikasi oleh peneliti sebelumnya. Isolat aktinobakteri terpilih diidentifikasi menggunakan gen 16S rRNA. Pigmen aktinobakteri diekstraksi sampai memdapat esktrak kasar pigmen. Aktivitas antioksidan ekstrak kasar pigmen diukur menggunakan metode DPPH (1,1- diphenyl-2-picrylhydrazil). Hasil pengukuran aktivitas antioksidan dihitung dalam persen inhibisi lalu digambarkan melalui nilai IC50 (inhibitory capacity). Ekstrak kasar pigmen yang menghasilkan aktivitas antioksidan tertinggi selanjutnya dianalisis menggunakan Liquid Chromatography Mass Spectrophotometer (LCMS) untuk mengidentifikasi profil kimia yang terdapat di dalam ekstrak pigmen dan berpotensi menghasilkan antioksidan. Berdasarkan hasil penelitian diperoleh lima isolat aktinobakteri berpigmen yaitu HRA, HVA, HVB, AGM2.2 dan AGM2.3. Identifikasi berdasarkan gen 16S rRNA menunjukkan bahwa isolat HRA memiliki nilai kemiripan 99,91% dengan Streptomyces gramineus JR-43, isolat HVA memiliki nilai kemiripan 99,22% dengan S. tendae ATCC 19812 dan isolat HVB memiliki nilai kemiripan 81,18% dengan Rhodococcus ruber DSM 43338. Isolat AGM2.2 dan AGM2.3 memiliki kemiripan dengan S. xanthophaeus NRRL B-5414 dengan nilai kemiripan masing masing sebesar 98,95% dan 99,82%. Spektrum UV-Vis ekstrak kasar pigmen isolat HRA adalah 411 nm, isolat HVA 663 nm, isolat HVB 459 nm, isolat AGM2.2 663 nm, dan isolat AGM2.3 664 nm. Konsentrasi hambat (IC50) pigmen ekstrak kasar aktinobakteri berkisar dari 53,38 µg/mL hingga 184,38 µg/mL. Isolat HVB memiliki aktivitas antioksidan paling tinggi. Ekstrak kasar pigmen isolat HVB mengandung senyawa luteolin dan berpotensi sebagai penghasil antioksidan.