Pertumbuhan Virus Newcastle Disease Isolat Lokal di Kultur Sel Lestari Vero 9013

Abstract

Virus Newcastle Disease (ND) mempunyai kemampuan onkolitik yang dapat dimanfaatkan untuk terapi kanker pada manusia. Virus ND yang digunakan sebagai agen terapi harus dapat dikultur pada sel mamalia untuk menjamin keamanan dan keberhasilan terapi. Penelitian ini bertujuan mengetahui kemampuan pertumbuhan virus ND genotipe VII asal Sulawesi Selatan di kultur sel lestari Vero 9013. Virus dengan titer sebesar 27 HAU/25 µL diinokulasi pada sel lestari Vero 9013 dan telur ayamberembrio (TAB). Sel dikultur pada media yang mengandung Dulbecco’s modified Eagle medium tinggi glukosa, 10% fetal calf serum, dan penisilinstreptomisin. Sel yang sudah konfluen diinokulasi virus kemudian diinkubasi pada suhu 37°C dalam inkubator CO2 5%. Sel diamati sampai cytopathic effects (CPE) terbentuk, kemudian dikonfirmasi dengan reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Inokulasi virus pada TAB mengikuti prosedur standar World Organisation Animal Health. Titer virus hasil inokulasi in-vitro dan in-ovo diukur dengan uji Hemagglutination Assay. Sel mengalami perubahan 24 jam setelah diinfeksi, CPE yang terbentuk berupa vakuola dan kematian sel. Hasil uji RT-PCR inokulasi in-vitro dengan primer ND fusion-F dan ND fusion-R positif pada panjang basa 535 bp. Hasil inokulasi in-vitro dan in-ovo menghasilkan titer virus sebesar 2 3 HAU/25 µL dan 25 HAU/25 µL. Berdasarkan hasil penelitian ini virus ND dapat ditumbuhkan di kultur sel lestari Vero 9013.