Kajian Hematologi pada Mencit (Mus musculus) pasca Imunisasi Amyloid Beta 40 dan 42 sebagai Marka Penyakit Alzheimer

Abstract

Salah satu penyakit pada lansia yang beresiko terjadi di Indonesia adalah penyakit Alzheimer. Upaya diagnosis untuk pencegahan dini berupa terapi definitif sejauh ini belum ditemukan. Upaya diagnosis yang tepat menuntut akurasi dalam pemilihan marka biologis, metode uji yang handal serta hewan model yang tervalidasi. Penelitian ini bertujuan untuk melihat gambaran hematologi pada mencit BALB/c setelah diimunisasi dengan antigen amyloid beta 40 (Aβ40) dan amyloid beta 42 (Aβ42) sebagai marka penyakit Alzheimer. Penelitian ini menggunakan 30 ekor mencit BALB/c umur 6 minggu dengan kisaran berat 30-40 g. Mencit dibagi ke dalam tiga kelompok (n=10 ekor), terdiri dari kelompok perlakuan Aβ40 (diimunisasi dengan antigen Aβ40), kelompok Aβ42 (diimunisasi dengan antigen Aβ42), dan kelompok kontrol (tidak diimunisasi, baik dengan antigen Aβ40 maupun Aβ42). Masing-masing antigen Aβ diberikan dengan dosis 100 uL/ekor (titer 15.000 pg/mL). Sebelum imunisasi, masing-masing anigen Aβ dicampur dengan Incomplete Freund’s Adjuvant dengan perbandingan 1:1. Imunisasi dilakukan pada minggu pertama (hari ke-0), minggu kedua (hari ke-7), minggu ketiga (hari ke-14) dan minggu keempat (hari ke-21). Pengambilan sampel darah dilakukan pada hari ke-24 pada semua kelompok perlakuan dengan metode retro-orbital menggunakan tabung kapiler sebanyak 500 uL/ekor untuk dianalisis terhadap parameter hematologi. Hasil pengamatan menunjukkan bahwa jumlah total leukosit, jumlah eritrosit, dan nilai red blood cell distribution width/RDW pada kelompok yang diimunisasi Aβ40 nyata lebih tinggi (p<0,05), sedangkan pada kelompok yang diimunisasi Aβ42 menunjukkan jumlah total leukosit, kadar hemoglobin/Hb, dan nilai mean corpuscular hemoglobin concentration/MCHC yang nyata lebih rendah (p<0,05) dan jumlah eritrosit yang nyata lebih tinggi (p<0,05) dibandingkan dengan kelompok kontrol. Pemberian antigen Aβ40 dan Aβ42 pada mencit BALB/c memengaruhi beberapa parameter hematologi (jumlah total leukosit, jumlah eritrosit, dan nilai RDW pada kelompok Aβ40, dan jumlah total leukosit, kadar Hb, dan nilai MCHC pada kelompok Aβ42). Namun demikian nilainya masih dalam kisaran referensi nilai normal.

Alzheimer’s disease is a common threat to Indonesia’s elderly population. Thus far, no definitive therapy for prevention of the disease has been discovered. The development of an early diagnosis technique requires an accurate biomarker, a reliable method of diagnosis, and validated animal models. The objective of this experiment was to study the profile of hematological parameters of BALB/c mice after immunization with amyloid beta 40 (Aβ40) and amyloid beta 42 (Aβ42) antigens as Alzheimer's disease markers. Thirty BALB/c mice, 6 weeks old, weighing 30 to 40 grams were used in this experiment. The mice were divided into three groups (n=10 for each group), consisting of the Aβ40 group (immunized with Aβ40 antigen), the Aβ42 group (immunized with Aβ42 antigen) and the control group (was not immunized, both with Aβ40 and Aβ42 antigens). Each amyloid antigen (Aβ40 and Aβ42) was given at a dose of 100 µL/head (titre 15,000 pg/mL). Prior to immunization, each amyloid antigen was mixed with incomplete Freund’s adjuvant in a ratio of 1:1. Immunization was carried out on the 0, 7th, 14th, and 21st days. On the 24th day, blood samples were collected from the retro orbital vein of each mouse using a capillary tube of 500 µL/head for hematology analysis. Results of this experiment showed that the total leukocyte count, erythrocyte count, and red blood cell distribution width/RDW values in the Aβ40 immunized group were significantly higher (p<0.05), whereas in the Aβ42 immunized group the total leukocyte count, hemoglobin/Hb levels, and the mean corpuscular hemoglobin concentration/MCHC were significantly lower (p<0.05) and the number of erythrocytes was significantly higher (p<0.05) compared to the control group. In conclusion, immunization with antigen Aβ40 in BALB/c mice increased the total leukocyte count, erythrocyte count, and RDW value. In contrast, immunization with antigen Aβ42 decreased the total leukocyte count, Hb levels, and MCHC value and increased the erythrocyte count. However, the values were still within the normal reference range.