Analisis Perbandingan Teknik Purifikasi dan Karakterisasi Imunoglobulin Y (IgY) Spesifik Virus Influenza

Abstract

Penggunaan IgY sebagai alternatif dalam penggunaan serum antibodi dari mamalia. Purifikasi yang dilakukan adalah dengan menggunakan tiga metode. Metode (M1) adalah purifikasi dengan water soluble (WS) dan pengendapan NaCl, metode (M2) adalah purifikasi dengan pengendapan PEG-6000, dan terakhir metode (M3) adalah purifikasi dengan kombinasi pengendapan PEG-6000 dan ammonium sulfat. Metode yang dipilih tersebut dievalusi dan dibandingkan dengan purifikasi menggunakan kit (M4). Antibodi dari keempat hasil purifikasi berhasil diidentifikasi pada uji agar gel presipitasi (AGPT), hasil ini menunjukkan keseluruhan metode purifikasi yang digunakan berhasil mendapatkan antibodi spesifik terhadap virus influenza. Hasil dari SDS-PAGE menunjukkan pada seluruh metode purifikasi yang dilakukan, pada M1 ditemukan 5 pita protein (189,78; 135,82; 95,41; 67,33 dan 27,98 kDa), M2 ditemukan 4 pita protein (95,41; 64,28; 58,84 dan 19,75 kDa), M3 ditemukan 5 pita protein (189,78; 95,41; 67,02; 64,28 dan 28,11 kDa), dan pada M4 ditemukan 4 pita protein (189,78; 108,16; 67,33 dan 28,11 kDa). Hasil dari Western Blot mengonfirmasi bahwa pada seluruh metode (M1-M4), terdapat kemunculan antibodi terhadap virus influenza. Penghitungan konsentrasi protein diketahui pada M4 memiliki nilai tertinggi (9,931±0,214 mg/ml), diikuti oleh M1 (6,944±0,979 mg/ml), M2 (4,402±0,319 mg/ml), M3 (3,684±0,337 mg/ml). Konsentrasi protein pada M2 dan M3 berbeda nyata (P>0,05) terhadap M1 dan M4. Penelitian ini berhasil mengkarakterisasi IgY spesifik virus influenza serta berhasil menentukan metode purifikasi terbaik dalam menghasilkan IgY.