Studi denaturasi dan renaturasi protease dari Bacillus pummilus Y1

Abstract

Enzim Protease sangat besar peranannya sebagai biokatalisator reaksi-reaksi dan proses penting dalam industri, terutama dalam industri pangan. Namun peranannya yang besar tersebut dibatasi oleh kerapuhan struktur proteinnya, yang menyebabkan enzim mudah terdenaturasi dan inaktif. Penelitian ini bertujuan untuk mempelajari kemampuan beberapa bahan kimiawi untuk merenaturasi enzim protease dari Bacillus pumilus Y1 yang sudah terdenaturasi secara kimiawi oleh Guanidin Hidroklorida. Dengan renaturasi diharapkan agar efisiensi penggunaan enzim dapat lebih ditingkatkan. Penelitian ini menggunakan enzim protease dari Bacillus pumilus Y1 yang diisolasi sebelumnya di PAU Bioteknologi IPB, diproduksi dalam media limbah cair tahu dan ditambah skim 0.5%. Denaturasi struktur protein enzim dapat disebabkan oleh lingkungan enzim tersebut seperti suhu, pH, bahan kimia, oksidasi dan hidrolisis proteolisis. Dalam penelitian ini yang dimaksud dengan denaturasi yaitu perubahan konformasi protein enzim, yang mengakibatkan penurunan aktivitas. Untuk studi denaturasi dalam penelitian ini digunakan Guanidin Hidroklorida (Gdn-HCI). Dari penelitian pendahuluan yang telah dilakukan, diketahui bahwa inkubasi dengan Gdn- HCI 1.5 M selama 2 jam dalam buffer borat 0.025 M, dapat menurunkan aktifitas enzim protease Bacillus pumilus Y1 dengan maksimal. Kondisi inilah yang kemudian digunakan lebih lanjut untuk mendenaturasi enzim yang akan digunakan untuk studi renaturasi. Pada proses renaturasi, enzim yang sudah terdenaturasi atau terbuka lipatannya ditambahkan beberapa bahan kimia seperti garam logam, detergen, senyawa polihidroksi dan diberi beberapa perlakuan fisik seperti pengenceran dan dialisis. ...