Peranan Protein ProAKAP4 terhadap Kualitas dan Freezability Semen Beku Sapi Bali (Bos sondaicus) pada Umur Berbeda

Abstract

Sapi bali adalah salah satu jenis dari sapi potong yang banyak dikembangkan di Indonesia. Sapi bali merupakan ternak ruminansia endemik Indonesia yang mempunyai keragaman keunggulan, diantaranya yaitu kualitas genetik unggul, mempunyai kemampuan beradaptasi pada lingkungan yang mempunyai kualitas hijauan yang rendah, mempunyai tingkat produksi dan reproduksi yang sangat baik. Penyebaran sapi bali terjadi sejak adanya kebijakan menggalakkan sapi bali di Indonesia khususnya di Provinsi Nusa Tenggara Barat (NTB). Hal ini dapat dilihat berdasarkan data Direktorat Jenderal Peternakan dan Kesehatan Hewan Kementerian Pertanian RI populasi sapi potong di Provinsi NTB sebanyak 1.474.516 ekor dengan jumlah pejantan 487.770 ekor yang sebagian besar adalah sapi bali. Performa reproduksi sapi bali jantan salah satunya dapat dinilai dari kualitas semen yang dihasilkan. Kualitas semen ditunjukkan melalui nilai motilitas sperma, morfologi sperma normal dan abnormal, konsentrasi dan viabilitas sperma. Kualitas semen menjadi indikator penting dalam produksi semen beku. Penerapan aplikasi teknologi reproduksi inseminasi buatan (IB) menggunakan semen beku salah satu upaya untuk mempertahankan dan meningkatkan populasi sapi bali. Keberhasilan pembekuan semen berhubungan dengan kemampuan sperma bertahan dari proses pembekuan atau disebut recovery rate (RR). Sperma yang mempunyai nilai RR yang tinggi dapat diartikan high freezability. Tingkat freezability sperma dipengaruhi oleh rumpun, individu, dan umur sapi. Kualitas semen saat ini dinilai secara konvensional atau menggunakan peralatan analisis semen berbantuan computer (CASA) yang mahal. Evaluasi freezability sperma sapi di BIB hanya berdasarkan motilitas sperma, sedangkan pada sperma manusia kualitas sperma yang berhubungan dengan freezability telah teridentifikasi berkaitan dengan protein. Penggunaan Bull 4MID (4BioDx, Lille, France) untuk analisis ProAKAP4 dapat memberikan analisis kualitas semen yang lebih akurat dan objektif. Peran AKAP4 terbukti terhadap fertilitas sapi jantan telah meningkat bertahun-tahun. Konsentrasi ProAKAP4 berkorelasi dengan motilitas total dan motilitas progresif sperma pada sapi jantan. Pengujian konsentrasi ProAKAP4 sapi bali belum dilaporkan sehingga penelitian ini dilakukan untuk menentukan konsentrasi ProAKAP4 dan berbagai parameter analisis kualitas semen beku secara akurat dan objektif. Enam ekor sapi bali yang terbagi menjadi dua kelompok umur (>5 tahun dan <5 tahun) dari Unit Pelayanan Teknis Daerah (UPTD) Balai Inseminasi Buatan Daerah (BIBD) NTB digunakan dalam penelitian ini. Semen dikoleksi menggunakan vagina buatan dan segera dibawa ke laboratorium untuk dilakukan evaluasi secara makroskopis dan mikroskopis. Semen segar sesudah dievaluasi kemudian diencerkan dengan pengencer Andromed. Semen selanjutnya dilakukan proses pengemasan, dilanjutkan dengan ekuilibrasi semen selama 4-5 jam dan dibekukan. Pembekuan dilakukan di atas uap nitrogen cair selama 10 menit selanjutnya disimpan dalam container nitrogen cair untuk evaluasi lebih lanjut. Semen beku di-thawing terlebih dahulu sebelum dievaluasi. Thawing semen beku dilakukan dalam water bath suhu 37oC selama 30 detik. Parameter kualitas semen beku adalah motilitas dan kinematik sperma, viabilitas, morfologi sperma, membran plasma utuh, dan fragmentasi DNA. Pengujian dilakukan menggunakan mikroskop phase contrast (Olympus CX31RTSF) yang dilengkapi heating table. Kinematik sperma dievaluasi menggunakan Computer Assisted Sperm Analysis (CASA; Sperm vision™ 3.7 Minitube, Germany). Analisis ProAKAP4 menggunakan Kit Bull 4MID (Ref. 4VDX-18K4) yang dianalisis menggunakan mesin ELISA reader. Penelitian dirancang menggunakan Independent-Sample T-Test dengan taraf signifikansi 95%. Analisis statistik menggunakan IBM SPSS® Statistics versi 22.0 (IBM Corp., Armonk, NY, US). Data ditampilkan sebagai mean± SD. Pengujian korelasi antar variabel dengan konsentrasi ProAKAP4 dianalisis menggunakan metode korelasi pearson. Hasil penelitian menunjukkan volume semen, motilitas, viabilitas, membran plasma utuh (MPU), dan konsentrasi sperma semen segar sapi bali kelompok umur >5 tahun lebih tinggi dibandingkan dengan kelompok umur <5 tahun. Semen beku sapi bali pada umur >5 tahun menunjukkan MPU yang lebih tinggi dan fragmentasi DNA yang lebih rendah dibandingkan dengan sapi bali umur <5 tahun. Nilai recovery rate sperma sapi bali tidak terdapat perbedaan antara dua kelompok umur. Kinematik sperma semen beku sapi bali terdapat perbedaan dari tiga indikator lebih tinggi pada sapi umur <5 tahun dibandingkan dengan umur >5 tahun, namun secara keseluruhan parameter kinematik sperma memiliki standar minimum dalam melakukan fertilisasi. Konsentrasi ProAKAP4 pada kelompok umur >5 tahun lebih tinggi dibandingkan dengan kelompok umur <5 tahun. Uji korelasi berbagai parameter kualitas semen beku dengan konsentrasi ProAKAP4 menunjukkan motilitas progresif dan viabilitas semen beku berkorelasi positif dengan konsentrasi ProAKAP4. Konsentrasi ProAKAP4 dalam sperma semakin tinggi, maka semakin tinggi nilai motilitas progresif dan viabilitas. Kualitas semen segar dan semen beku pada kelompok umur >5 tahun menunjukkan kualitas yang baik daripada sapi kelompok umur <5 tahun. Kualitas dan kinematik sperma semen beku sapi bali tergolong baik mempunyai nilai yang sudah cukup dalam proses fertilisasi.