Keragaman Grup Gen Hormon Pertumbuhan (GH, GHR, GHRH, dan Pit-1) dan Hubungannya dengan Respon Superovulasi, Tingkat Ovulasi, Tingkat Fertilisasi dan Kualitas Embrio Sapi di Balai Embrio Ternak (BET) Cipelang

Abstract

ABSTRACT SUMANTRI, C., M. IMRON, SUGYONO, E. ANDREAS, R. MISRIANTI and A.B.L. ISHAK. 2011. Growth hormone gene family (GH, GHR, GHRH and Pit-1) polymorphisms and its association with superovulation response, ovulation rate, fertilization rate and embryo quality in Embryo Transfer Station (BET) of Cipelang. JITV 16(2): 126-139. The decrease in fertility is considered to be the main cause of reproductive loss in dairy cattle and beef industry. Many candidate genes that play an important role in fertility and embryonic development. The purpose of this study was to detect genetic variations of the growth hormone gene family (GH|MspI, GH|AluI, GHR|AluI, GHRH|HaeIII and Pit-1|HinfI) and its association with superovulation response, ovulation, fertilization and transferable embryos rate. A total of 45 blood samples taken from cows that have been superovulated Angus, Brahman, HF, Limousin and Simmental. DNA was extracted with phenol-chloroform protocol followed by polymerase chain reaction technique (PCR) using specific primers for GH, GHR, GHRH and Pit-1 gene. PCR product was cut with restriction enzyme MspI, AluI, HaeIII and HinfI and electrophoresed on agarose gel and stained with ethidium bromide (EtBr). Superovulation is done by injecting a totally of 20 ml FSH for 4 days. Injecting the prostaglandin hormone (PGF2α) was performed on the eleventh day of CIDR implantation. Artificial insemination (AI) performed two or three days after the injection of PGF2α and Flushing was done on the seventh day after the AI. The results showed that the Angus, Limousin, Brahman and Simental GH loci diversity of GH|MspI, GH|AluI, GHR|AluI, GHRH|HaeIII and Pit-1|HinfI was not associated with superovulation response, ovulation, fertilization and transferable embryo rate. In HF dairy cattle, genotype on Pit-1|HinfI AA has higher percentage of superovulation response (P < 0.05) when compared to AB genotype, but did not differ to BB genotype. Dairy cattle HF AA genotype also had higher ovulation rate (P < 0.05) when compared to AB and BB genotypes, but AB and BB have the same ovulation rate.

ABSTRAK SUMANTRI, C., M. IMRON, SUGYONO, E. ANDREAS, M. RESTU dan A.B.L. ISHAK. 2011. Keragaman grup gen hormon pertumbuhan (GH, GHR, GHRH dan Pit-1) dan hubungannya dengan respon superovulasi, tingkat ovulasi, tingkat fertilisasi dan kualitas embrio sapi di Balai Embrio Ternak (BET) Cipelang. JITV 16(2): 126-139. Penurunan daya reproduksi menjadi penyebab utama kerugian pada industri sapi perah dan pedaging. Banyak gen kandidat yang berperan penting dalam fertilitas dan perkembangan embrio. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mendeteksi variasi genetik dari grup gen hormon pertumbuhan (GH|MspI, GH|AluI, GHR|AluI, GHRH|HaeIII dan Pit-1|HinfI) dan hubungannya dengan respon superovulasi, tingkat ovulasi, tingkat fertilisasi dan embrio layak transfer pada berbagai bangsa sapi. Sebanyak 45 sampel darah diambil dari sapi yang telah disuperovulasi yaitu Angus, Brahman, FH, Limousin dan Simmental. DNA diekstraksi dengan fenol-kloroform protokol dan dilanjutkan dengan teknik polymerase chain reaction (PCR) dengan menggunakan primer spesifik untuk GH, GHR, GHRH dan Gen Pit-1. Produk PCR dipotong dengan enzim restriksi MspI, AluI, HaeIII dan HinfI dan dielektroforesis pada gel agarose dengan pewarnaan Etidium Bromida (EtBr). Superovulasi dilakukan dengan menyuntikan total 20 ml FSH selama 4 hari pagi dan sore berturut-turut dengan dosis menurun. Penyuntikan hormon prostaglandin (PGF2α) dilakukan pada hari kesebelas implantasi CIDR. Inseminasi Buatan (IB) dilakukan dua atau tiga hari setelah penyuntikan PGF2α Flushing dilakukan pada hari ketujuh setelah IB. Hasil menunjukkan pada bangsa sapi Angus, Limousin, Brahman dan Simental keragaman lokus GH|MspI, GHR|AluI, GHRH|HaeIII, Pit-1|HinfI dan GH|AluI tidak berasosiasi dengan respon superovulasi (RS), tingkat ovulasi (TO), persentase tingkat fertilisasi (TF) dan persentase embrio layak transfer (ELT). Pada sapi FH bergenotipe Pit-1|HinfI AA mempunyai persentase respon superovulasi (RS) yang lebih tinggi (P < 0,05) bila dibandingkan dengan genotipe AB, tetapi tidak berbeda dengan genotipe BB. Sapi FH bergenotipe AA juga mempunyai tingkat ovulasi lebih tinggi (P < 0,05) bila dibandingkan dengan genotipe AB dan BB, tetapi AB dan BB mempunyai tingkat ovulasi yang sama