Preparasi Serum Kelinci Spesifik Terhadap Imunoglobulin Y (Lgy) Ayam Yang Dimurnikan Dengan Menggunakan Ion Exchange Chromatography

Abstract

Pengembangan metode yang cepat dan mudah diperlukan dalam upaya penentuan status imunologis ayam. Hal ini dapat dilakukan dengan memanfaatkan aktifitas biologis protein A Staphylococcus aureus melalui metode koaglutinasi. Umumnya antibodi mamalia mempunyai kemampuan untuk berikatan dengan protein A S. aureus pad a fraksi Fc-lgG. Pad a unggas, fraksi utama imunoglobulin unggas IgY sama sekali tidak mampu berikatan dengan protein A S. aureus. Pembuatan antibodi kelinci spesifik terhadap IgY ayam berfungsi sebagai penghubung protein A pada permukaan sel bakteri Staphylococcus dengan imunoglobulin ayam. Pemurnian IgY ayam dapat dilakukan dengan dua tahap, yaitu pengendapan amonium sulfat yang dilanjutkan dengan ion-exchange chromatography. Pemantauan kemurnian terhadap IgY dapat dilakukan dengan spectrophotometer pad a panjang gelombang 280 nm, yang dilanjutkan dengan pengujian menggunakan SOS-PAGE. Antibodi kelinci spesifik terhadap IgY ayam dihasilkan dari penyuntikan berkala 1 ml IgY. Adanya antibodi spesifik terhadap IgY diketahui oleh adanya reaksi silang yang dinyatakan pembentukan garis presipitat pad a uji imunodifusi.