Purifikasi Parsial dan Karakterisasi Lakase dari Isolat Baru Leiotrametes flavida Strain ZUL62.

Abstract

Sebanyak lima jenis isolat fungi telah diisolasi dari Hutan Kerangas di Bangka Belitung. Penapisan untuk isolat penghasil lakase terbaik dilakukan dalam dua tahapan penapisan. Isolat fungi pelapuk putih Leiotrametes flavida Strain ZUL62 menghasilkan aktivitas lakase tertinggi selama 4 hari dengan media fermentasi padat ampas sagu (39.95 U/mL). Lakase dipurifikasi dengan pengendapan 40-60% amonium sulfat menghasilkan yield sebesar 8.05% dengan kemurnian 6.57 kali (aktivitas spesifik sebesar 5122.410 U/mg). Aktivitas maksimum lakase diperoleh pada pH 5 dan suhu 40 oC. 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid) atau ABTS digunakan sebagai substrat menunjukan parameter kinetika enzim dengan Vmaks sebesar 2.25 μmol/menit dan Km 3.42 mM. Penambahan ion Mg2+, Mn2+, dan Zn2+ meningkatkan aktivitas lakase, sedangkan NaN3 menginhibisi enzim sepenuhnya.