Kloning Gen Penyandi Adp-Glukosa Pirofosforilase Dari Tanaman Sagu (Metroxylon Sagu Rottb.)

Abstract

Tanaman sagu merupakan tanaman penghasil pati yang sangat potensial karena merupakan tanaman penghasil karbohidrat tertinggi. ADP-glukosa pirofosforilase adalah salah satu enzim yang berperan penting dalam biosintesis pati, sehingga aktivitas enzim ini mempengaruhi rendemen pati yang dihasilkan. Penelitian bertujuan mengisolasi dan mengklon gen AGP dari jaringan tanaman sagu ke dalam E. coli XL1-blue dengan vektor pGEM-T Easy. Fragmen gen target diamplifikasi dari cDNA yang berasal dari mRNA jaringan tanaman sagu dengan teknik Reverse Transcription-PCR menggunakan primer AGP-MS2. Gen AGP target diligasi pada plasmid pGEM-T Easy dengan bantuan enzim T4 ligase. Plasmid rekombinan ditransformasi dengan metode kejutan panas pada sel E. coli XL1-blue dan diseleksi menggunakan medium LB agar yang mengandung ampisilin. Hasil penelitian menunjukkan bahwa amplifikasi gen AGP dengan primer AGP-MS2 menghasilkan amplikon berukuran ±1700 pb, dan gen AGP hasil amplifikasi telah berhasil diklon ke dalam plasmid pGEM-T Easy .