Isolasi dan pemurnian protein inhibitor RNA helikase virus hepatitis C dari kapang endofit CgKTm 5 F

Abstract

Hepatitis C merupakan penyakit yang disebabkan oleh infeksi virus hepatitis C (HCV), dan menjadi masalah kesehatan yang belum teratasi karena pengobatan yang dilakukan memiliki efiseinsi yang rendah dan mahal. Pengobatan penyakit hepatitis C berdasarkan molekul target banyak dikembangkan akhir-akhir ini, diantaranya mengarah pada target RNA helikase virus hepatitis C. RNA helikase berfungsi dalam replikasi HCV, sehingga penghambatannya dapat memutus siklus hidup virus ini. Penghambatan terhadap RNA helikase dapat dilakukan oleh protein dari kapang endofit CgKTm 5 F. Penelitian ini bertujuan melakukan isolasi dan pemurnian protein inhibitor dari kapang endofit CgKTm 5 F yang mempunyai aktivitas inhibisi terhadap RNA helikase HCV. Isolasi dilakukan dengan pengendapan amonium sulfat 90% dan pemurnian dilakukan dengan kromatografi gel filtrasi Sephadex G-50 dengan pelarut metanol 40%. Uji ATPase digunakan untuk menghitung aktivitas inhibisi RNA helikase HCV. Fraksi ke- 8 hasil kromatografi gel filtrasi memiliki aktivitas tertinggi dalam menghambat RNA helikase HCV. Analisis SDS-PAGE terhadap fraksi tersebut menunjukkan bahwa terdapat empat pita protein dan semuanya memiliki bobot molekul > 17 kDa. Aktivitas spesifik protein inhibitor pada fraksi ke- 8 sebesar 5.92x10-4 U/mg dengan kemurnian 5.38.