Pemanfaatan limbah agar-agar kertas untuk produksi enzim selulase dari kapang Trichoderma viride

Abstract

Industri pembuatan agar-agar kertas menghasilkan limbah hasil samping pengolahan yang cukup banyak. Penanggulangan dan pemanfaatan limbah ini belum tertangani secara baik sehingga perlu mendapatkan perhatian yang cukup. Limbah pengolahan agar-agar kertas merupakan salah satu limbah yang banyak mengandung komponen lignoselulotik yang dapat dimanfaatkan sebagai medium pertumbuhan mikroorganisme. Penelitian ini bertujuan untuk memanfaatkan limbah agar-agar kertas sebagai medium fermentasi kapang Trichoderma viride untuk produksi enzim selulase. Penelitian ini dilakukan dalam dua tahap. Penelitian tahap I bertujuan untuk mendapatkan serbuk limbah pengolahan agar-agar kertas yang akan digunakan untuk media pertumbuhan kapang Trichoderma viride. Serbuk limbah agar-agar kertas dianalisis kadar air, abu, protein, lemak, karbohidrat, selulosa, hemiselulosa, lignin, dan serat kasar. Penelitian tahap II bertujuan untuk mempelajari pengaruh penambahan nutrisi dan waktu inkubasi terhadap aktivitas enzim selulase yang dihasilkan. Sebanyak 10 gram serbuk limbah agar-agar kertas dimasukkan ke dalam erlenmeyer berkapasitas 250 ml dan ditambahkan larutan nutrisi sesuai perlakuan yaitu 0:4 (A1), 1:4 (A2), 2:4 (A3) terhadap substrat. Kemudian ditambahkan akuades hingga kadar air mencapai 80% berat basah dan disterilkan pada suhu 121°C selama 30 menit. Biakan Trichoderma viride yang berumur 7 hari pada agar miring disuspensikan ke dalam 10 ml akuades steril. Suspensi kapang ini sebanyak 4% diinokulasikan ke dalam media pertumbuhan yang telah steril, kemudian diinkubasikan pada suhu 30°C selama 3 hari (B1), 6 hari (B2), 9 hari (B3), dan 12 hari (B4). Ekstraksi dilakukan dengan menambahkan larutan pengekstrak (Tween 80 0,2%) sebanyak 10 kali berat substrat dan dikocok dengan menggunakan shaker 150 rpm selama satu jam. Selanjutnya disentrifusi dengan kecepatan 2000 rpm selama 20 menit untuk menghasilkan filtrat enzim kasar. Enzim kasar yang diperoleh di uji aktivitas selulase total (filter paperase), aktivitas endoglukanase (carboxy methyl celulase), gula pereduksi, protein terlarut, dan pH....