Purifikasi parsial B-Galaktosidase Enterobacter cloacae dan penentuan karakternya pada kondisi Teramobil dengan Na-Alginat

Abstract

Enzim ẞ-galaktosidase (EC 3.2.1.23) merupakan enzim yang dapat menghidrolisis laktosa menjadi glukosa dan galaktosa. Pada penelitian ini, purifikasi parsial B-galaktosidase dilakukan dengan metode pengendapan diikuti dengan dialisis, sementara amobilisasinya dilakukan menggunakan Na-alginat. Tujuan penelitian ini adalah melakukan purifikasi parsial ẞ-galaktosidase dari Enterobacter cloacae dan karakterisasi {pH optimum, suhu optimum, parameter kinetika (Vmaks dan KM)} pada kondisi teramobilisasi dengan Na-alginat. Aktivitas spesifik ẞ- galaktosidase pada ekstrak kasar, pengendapan amonium sulfat 40%, dan dialisis masing-masing sebesar 2.167 U/mg, 5.297 U/mg, dan 12.586 U/mg dengan faktor pemurnian masing-masing sebesar 1,000; 2,445 dan 5,809. Kondisi optimum ẞ- galaktosidase E. cloacae purifikasi parsial yang teramobilisasi adalah pada suhu 40°C dengan aktivitas sebesar 0.012 U/mL dan pada pH 7 dengan aktivitas sebesar 0.009 U/mL, sedangkan parameter kinetikanya adalah Vmaks sebesar 1.273 µmol/menit dan nilai KM sebesar 1.961 mM.