Isolasi dan Karakterisasi Bakteri Proteolitik Asal Feses Kuda (Equus caballus)

Abstract

Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menyeleksi bakteri proteolitik sebagai kandidat bakteri pendegradasi protein asal feses kuda secara morfologi dan biokimia. Penelitian dilakukan dalam tiga tahap. Tahap pertama adalah isolasi bakteri asal feses kuda dengan Skim Milk Agar + Rumen 10% dan tahap kedua dilakukan skrining bakteri proteolitik untuk mengetahui nilai indeks proteolitik tertinggi. Tahap ketiga dari hasil isolat terpilih dilanjutkan serangkaian uji karakterisasi yang meliputi uji gula pereduksi, uji makroskopis, uji katalase, pewarnaan gram, dan uji aktivitas enzim protease. Analisis aktivitas enzim menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) pola faktorial dengan perlakuan suhu dan pH. Suhu yang diuji adalah 40 ℃, 50 ℃, dan 60 ℃, pH yang diuji adalah 5, 6, 7, 8 dengan 3 kali ulangan. Hasil penelitian didapatkan isolat dengan nilai indeks proteolitik tertinggi yaitu isolat 1 (985.T.K.1.4 di SMA), isolat 2 (985.T.K.1.4 di SMA+R) dan isolat 3 (SMA+R.K.4.10). Hasil uji karakterisasi menunjukkan bahwa ketiga isolat memiliki morfologi yang hampir sama. Ketiga isolat tersebut merupakan bakteri gram negatif, dapat mendegradasi gula pereduksi dan memiliki aktivitas katalase. Pengujian morfologi menunjukkan bahwa ketiga isolat termasuk genus Bacteroides. Uji aktivitas enzim protease menunjukkan bahwa ketiga isolat melakukan aktivitas optimum pada suhu 60 ℃ dan pH 5 dengan nilai aktivitas enzim isolat 1 sebesar 0,027 U mL-1, isolat 2 dan 3 sebesar 0,018 U mL-1. Kesimpulannya, isolat 2 merupakan isolat yang memiliki nilai indeks proteolitik tertinggi dan perlu dilakukan analisis lebih lanjut.