Potensi Aktinobakteri Endofit Tanaman Bawang Dayak (Eleutherine palmifolia (L.) Merr) sebagai Penghasil Antioksidan

Abstract

Aktinobakteri endofit merupakan koloni aktinobakteri dalam jaringan suatu tanaman yang memiliki kemampuan untuk menghasilkan senyawa bioaktif. Persebaran koloni aktinobakteri endofit cukup tinggi karena mampu bertahan di berbagai kondisi lingkungan. Umumnya, aktinobakteri endofit menghasilkan senyawa bioaktif serupa dengan milik inangnya. Senyawa bioaktif banyak dimanfaatkan terkait bidang kesehatan, contohnya adalah aktivitas antioksidan flavonoid. Antioksidan dapat menghambat kelebihan radikal bebas dari polusi kendaraan bermotor hingga radiasi barang elektronik yang masuk ke dalam tubuh manusia. Selain itu, antioksidan juga mencegah munculnya penyakit akibat gangguan pada fungsi sel tubuh, seperti kanker payudara. Tanaman bawang dayak (Eleutherine palmifolia (L.) Merr) yang juga dikenal dengan nama bawang Tiwai menjadi salah satu contoh tanaman yang diketahui menghasilkan flavonoid. Bawang dayak biasanya diolah menjadi ramuan tradisional untuk konsumsi karena diyakini mampu menyembuhkan tumor dan kanker payudara. Informasi mengenai aktivitas antioksidan senyawa bioaktif dari bawang dayak telah banyak dikaji di masyarakat, namun penelitian tentang aktivitas antioksidan senyawa bioaktif dari aktinobakteri endofit asal bawang dayak masih terbatas. Oleh sebab itu, penelitian ini dilakukan dengan tujuan mengkaji aktivitas antioksidan senyawa bioaktif yang dihasilkan aktinobakteri endofit bawang dayak. Aktivitas antioksidan sampel dalam penelitian ini diukur menggunakan metode DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazil) dan ABTS (2,2-azinobis-3-ethyl benzothiazoline-6-sulphonic acid). Hasil pengukuran aktivitas antioksidan dihitung dalam persen inhibisi lalu digambarkan melalui nilai IC50 (inhibitory capacity). Senyawa flavonoid dalam sampel penelitian ini diidentifikasi menggunakan metode kromatografi lapis tipis (KLT) dan bioautografi aktivitas antioksidan DPPH. Hasil KLT dideteksi menggunakan UV transilluminator. Selanjutnya kadar total flavonoid dihitung menggunakan metode kolorimetrik aluminium klorida (AlCl3). Terdapat enam isolat aktinobakteri endofit yang berhasil diisolasi dari bawang dayak. Enam isolat tersebut memiliki jumlah rendemen yang berbeda dan isolat EPB 6 menghasilkan rendemen terbanyak sebesar 0.013%. Jumlah rendemen bawang dayak lebih besar dibandingkan keenam isolat aktinobakteri endofit, yaitu sebesar 0.070%. Nilai rata-rata IC50 yang dihasilkan isolat EPB 3 menunjukkan hasil terbaik dengan metode DPPH dan ABTS masing-masing sebesar 53.85 mg/ml dan 42.43 mg/ml. Ekstrak bawang dayak memiliki nilai rata-rata IC50 sebesar 49.11 mg/ml dengan DPPH dan 36.11 mg/ml dengan ABTS. Hasil amatan dengan UV 366 nm menunjukkan ekstrak bawang dayak memiliki warna spot yang berbeda dibandingkan ekstrak aktinobakteri endofit. Ekstrak aktinobakteri endofit isolat EPB 3 diketahui memiliki 2 spot senyawa biru dan merah, sedangkan ekstrak bawang dayak memiliki 3 spot senyawa merah, biru, dan hijau. Ekstrak aktinobakteri endofit isolat EPB 3 memiliki 3 spot aktif dengan nilai Rf 0.09, 0.33, 0.62 pada uji bioautografi aktivitas antioksidan DPPH. Ekstrak bawang dayak memiliki 4 spot aktif dengan nilai Rf 0.07, 0.21, 0.38, 0.88. Kadar total flavonoid ekstrak aktinobakteri endofit isolat EPB 3 sebesar 25.30 EQ/g adalah yang tertinggi di antara ekstrak isolat aktinobakteri endofit lainnya, sedangkan kadar total flavonoid ekstrak bawang dayak sebesar 46.03 EQ/g. Hasil dari penelitian ini menunjukkan bahwa aktinobakteri endofit dari bawang dayak memiliki senyawa bioaktif yang tergolong flavonoid dan berpotensi sebagai penghasil antioksidan.

Endophytic actinobacteria are actinobacterial colonies in plant tissues that have the ability to produce bioactive compounds. The distribution of endophytic actinobacteria colonies is quite high because they are able to survive in various environmental conditions. Generally, endophytic actinobacteria produce bioactive compounds similar to those of the host. Bioactive compounds are widely used in the health sector, for example, the antioxidant activity of flavonoids. Antioxidants can inhibit excess free radicals from motor vehicle pollution to radiation of electronic goods that enter the human body. In addition, antioxidants also prevent the emergence of diseases due to disturbances in body cell function, such as breast cancer. Dayak onion (Eleutherine palmifolia (L.) Merr) which is also known as Tiwai onion is an example of a plant known to produce flavonoids. Dayak onions are usually processed into traditional ingredients for consumption because they are believed to be able to cure tumors and breast cancer. Information regarding the antioxidant activity of bioactive compounds from dayak onions has been widely studied in the community, but research on the antioxidant activity of bioactive compounds from endophytic actinobacteria from dayak onions is still limited. Therefore, this study was conducted with the aim of assessing the antioxidant activity of bioactive compounds produced by endophytic actinobacteria of dayak onions. The antioxidant activity of the samples in this study was measured using the DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazil) and ABTS (2,2-azinobis-3-ethyl benzothiazoline-6-sulphonic acid) methods. The measurement results of antioxidant activity are calculated in percent inhibition and then described by the IC50 value (inhibitory capacity). The flavonoid compounds in the samples of this study were identified using thin layer chromatography (TLC) and bioautography of antioxidant activity of DPPH. TLC results were detected using a UV transilluminator. Furthermore, the total flavonoid content was calculated using the colorimetric method of aluminum chloride (AlCl3). There were six isolates of endophytic actinobacteria that were isolated from dayak onions. The six isolates had different yields and EPB 6 isolates produced the highest yield of 0.013%. The yield of dayak onions was greater than the six isolates of endophytic actinobacteria, which was 0.070%. The average IC50 value produced by EPB 3 isolates showed the best results with the DPPH and ABTS methods, which were 53.85 mg/ml and 42.43 mg/ml, respectively. Dayak onion extract had an average IC50 value of 49.11 mg/ml with DPPH and 36.11 mg/ml with ABTS. Observations with UV 366 nm showed that the dayak onion extract had a different spot color compared to the endophytic actinobacteria extract. It is known that the endophytic actinobacterial extract of EPB 3 isolate has 2 spots of blue and red compounds. Meanwhile, there were 3 spots of red, blue, and green compounds in the dayak onion extract. The endophytic actinobacterial extract of EPB 3 isolate had 3 active spot with an Rf value of 0.09, 0.33, 0.62 in the bioautographic test of antioxidant activity of DPPH. The dayak onion extract had 4 active spots with Rf values of 0.07, 0.21, 0.38, 0.88. The total flavonoid content of endophytic actinobacterial extract of EPB 3 isolate of 25.30 EQ/g was the highest among extracts of other endophytic actinobacteria isolates, while the total flavonoid content of the dayak onion extract was 46.03 EQ/g. The results of this study indicate that endophytic actinobacteria from dayak onions have bioactive compounds classified as flavonoids and have the potential to produce antioxidants.