Mutan Lada (Piper nigrum L.) dan Amplifikasi Gen Resisten terhadap Penyakit Busuk Pangkal Batang

Abstract

Lada (Piper nigrum L.) merupakan salah satu komoditas unggulan tanaman rempah yang dikembangkan untuk memenuhi kebutuhan ekspor. Upaya pengendalian penyakit busuk pangkal batang yang disebabkan oleh Phythoptora capcisi pada tanaman lada perlu dilakukan dengan menciptakan varietas unggul melalui mutasi. Analisis ketahanan mutan lada hasil iradiasi sinar gamma perlu dilakukan dengan pengujian molekuler seperti PCR. Tujuan penelitian ini adalah melakukan isolasi DNA mutan lada dan amplifikasi gen resisten terhadap penyakit busuk pangkal batang. DNA lada diisolasi dengan metode konvensional menggunakan bufer CTAB dengan tambahan nitrogen cair, senyawa PVP dan β-merkaptoetanol serta dilakukan dengan menggunakan perlakuan berupa penggunaan daun ke-1 dan ke-2 dari pucuk daun pada tanaman lada serta waktu inkubasi selama 10 menit dan 30 menit dalam air setelah penambahan bufer CTAB. DNA hasil isolasi dilakukan amplifikasi menggunakan primer RGA8. Hasil isolasi DNA dengan menggunakan perlakuan berupa penggunaan daun ke-1 dari pucuk serta waktu inkubasi selama 10 menit menghasilkan kualitas dan kuantitas DNA rata-rata yang lebih tinggi dibandingkan DNA hasil metode isolasi berupa penggunaan daun ke-2 dari pucuk dan waktu inkubasi selama 30 menit dalam air. Analisis pola pita hasil amplifikasi DNA mutan lada menunjukkan bahwa tanaman mutan lada diduga memiliki sifat tahan terhadap penyakit busuk pangkal batang.