Penapisan dan Karakterisasi Lipase dari Kapang Endofit untuk Sintesis Metil Ester.

Abstract

Limbah minyak goreng dapat merusak lingkungan karena sulit terdegradasi. Ada banyak cara untuk memecahkan kasus ini. Salah satu dari beberapa solusi digunakan biokatalis. Biokatalis dapat mensintesis minyak goreng limbah ke biodiesel atau metil ester. Produksi biokatalis dapat memanfaatkan mikrob yang ada di lingkungan, salah satunya kapang endofit. Penelitian yang berkaitan dengan kapang endofit penghasil biokatalis untuk sintesis metil ester belum banyak dilakukan. Penelitian bertujuan untuk menyaring jamur endofit untuk mensintesis metil ester dari minyak goreng limbah menggunakan lipase. Penelitian ini berawal dari penapisan secara kualitatif 122 isolat kapang edofit yang menjadi koleksi Pusat Penelitian Bioteknologi LIPI Cibinong dengan metode Rhodamin-B. Tahapan selanjutnya dilanjutkan penapisan secara kuantitatif dengan menggunakan metode spektrofotometri untuk menentukan isolat yang berpotensi menghasilkan enzim lipase dengan aktivitas tertinggi. Isolat potensial yang diperoleh dari proses penapisan dianalisa secara molekuler untuk menentukan jenis kapang tersebut. Selanjutnya, tahapan memproduksi enzim lipase dan dilanjutkan karakterisasi enzim lipase. Suhu, pH, dan pengaruh ion logam menjadi parameter yang dikarakterisasi dalam penelitian ini. Terakhir, pengujian potensi lipase yang dihasilkan isolat terpilih untuk menyintesis metil ester dengan bahan baku minyak jelantah. Hasil penelitian menunjukkan bahwa aktivitas ekstrak kasar lipase dari JB.70F.322 memiliki aktivitas sebesar 73.779 U/mL pada kondisi pH 6.0 dan suhu 37oC dibandingkan dengan isolat lainnya. Selanjutnya, isolat terpilih JB.70F.322 secara taksonomi diidentifikasi sebagai Fusarium fujikuroi dan urutan nukleotida juga disimpan di GenBank di bawah aksesi No.MH279455. Evaluasi aktivitas lipase JB.70F.322 dari hari pertama hingga hari ke-8 menunjukkan waktu panen terbaik adalah hari ke-4. Setelah pengendapan dengan polietilen glikol (PEG), kemurnian lipase meningkat 1,8 kali lipat dengan aktivitas spesifik 72,7 U/mg protein. Karakterisasi pH dan suhu menunjukkan aktivitas maksimum pada pH 8,0 dengan aktivitas 3316.2 U/mL dan 30oC dengan aktivitas 4917.5 U/mL. Analisis dengan menggunakan Kromatografi Gas-Spektrometer Massa (GCMS), sintesis metil ester dengan bantuan lipase yang dihasilkan isolat JB.70F.322 berpotensi untuk menyintesintesis methyl hexadecanoate dan methyl 9-octadecenoate.