Sensitivitas Virus Avian Influenza Subtipe H5N1 Clade 2.3.2 Asal Indonesia terhadap Obat Antiviral Amantadin

Abstract

Resitensi antiviral virus Avian Influenza (AI) subtipe H5N1 adalah tantangan pada pengendalian pandemik Influenza. Matrik 2 (M2) inhibitor (amantadin dan rimantadin) dan neuraminidase inhibitor (oseltamivir dan zanamivir) adalah 2 kelas antiviral yang aktif melawan secara spesifik virus influenza dan digunakan untuk pengobatan dan profilaksis infeksi virus influenza. Amantadin mengganggu siklus hidup virus dengan menghambat aliran ion hidrogen pada M2 ion channel virus influenza A. Hal ini mencegah uncouting pada sel inang yang terinfeksi sehingga menghambat pelepasan ribonukleoprotein untuk transkripsi dan replikasi virion dalam nukleus. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kepekaan virus AI subtipe H5N1 Clade 2.3.2 asal Indonesia terhadap obat antiviral amantadin secara molekular dan in vitro. Penelitian ini dilakukan dengan metode Reverse Transcriptase- Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) untuk mengidentifikasi virus AI subtipe H5N1 pada unggas, isolasi ke Telur Ayam Bertunas (TAB) umur 9-11 hari untuk mengisolasi virus AI subtipe H5N1 pada unggas, uji in vitro pada sel Madin Darby Canine Kidney (MDCK) dan uji sekuensing dan pohon filogenetik gen Matrik (M2) untuk mengetahui resistensi virus AI subtipe H5N1 Clade 2.3.2 asal Indonesia terhadap amantadine hydrochloride. Hasil penelitian menunjukkan sebanyak 24 pool sampel bereaksi positip terhadap RT-PCR dengan primer matrik, sebanyak 15 pool sampel bereaksi positif terhadap RT-PCR dengan primer H5 dan sebanyak 11 pool sampel bereaksi positip terhadap RT-PCR dengan primer N1. Sebanyak dua isolat virus AI subtipe H5N1 dapat diisolasi dari sampel yang dikoleksi dari Kota Serang dan sebanyak enam isolat virus AI subtipe H5N1 dari kasus AI pada unggas air di Kabupaten Lamongan. Titer EID50 isolat virus AI subtipe H5N1 adalah >108. Virus AI subtipe H5N1 Clade 2.3.2 asal Indonesia yang diisolasi tahun 2013 dan 2016 mempunyai substitusi asam amino V27I pada protein M2, menimbulkan Cytophatic effect (CPE) dan bereaksi positif Hemaglutinasi (HA) pada sel MDCK konfluen monolayer yang mengandung konsentrasi amantadine hydrochloride tertinggi yang tidak toksik. Kesimpulan penelitian adalah virus AI subtipe H5N1 dapat dideteksi dan diisolasi, dan substitusi asam amino V27I pada protein M2 virus AI subtipe H5N1 Clade 2.3.2 asal Indonesia yang diisolasi tahun 2013 dan 2016 berperan terhadap resistensi amantadine hydrochloride.