Pemurnian Dan Pengujian Aktivitas Enzim Rekombinan Dna Polimerase Pyrococcus Furiosus Asal Gen Sintetik

Abstract

Enzim asam deoksiribonukleat (DNA) polimerase merupakan enzim yang berperan sangat luas dalam perkembangan bioteknologi dan biologi molekuler, terutama dalam aplikasi teknik reaksi rantai polimerase (PCR). Penelitian ini bertujuan memurnikan enzim rekombinan DNA polimerase Pyrococcus furiosus (Pol-pfu) agar memperoleh aktivitas yang baik ketika diaplikasikan melalui teknik PCR. Pol-pfu kasar dimurnikan menggunakan metode kromatografi afinitas ion logam. Pemurnian ini menghasilkan 1 pita spesifik pada SDS-PAGE dengan bobot molekul sekitar 92 kD. Pol-pfu dengan konsentrasi 50 μg/mL berhasil digunakan untuk mengamplifikasi sampel DNA yang memiliki ukuran pasangan basa sebesar 200 hingga 2000. Hal ini menunjukkan bahwa Pol-pfu memiliki aktivitas sesuai dengan yang diharapkan, yaitu mampu mengamplifikasi sampel DNA berukuran pasangan basa kecil hingga besar.