Deteksi secara imunohistokimia antioksidan superoxide dismutase (sod) pada jaringan tikus hiperkolesterolemia

Abstract

Superoxide dismutase (SOD) adalah suatu antioksidan intrasel. SOD berperanan penting dalam melindungi sel terhadap gangguan oksidan, oxidative stress, yang dapat menyebabkan terjadinya beberapa penyakit dan proses degenerasi seperti ketuaan dan karsinogenesis (Ames dan Shigenaga, 1992). Namun demikian, masih sangat minim informasi ilmiah tentang profil SOD jaringan pada berbagai kondisi pathofisiologis dan beberapa penyakit, terutama pada kondisi hiperkolesterolemia. Penelitian ini bertujuan mendeteksi sel-sel penghasil antioksidan copper, zinc-superoxide dismute (Cu,Zn-SOD) pada hati dan ginjal tikus pada kondisi normal dan hiperkolesterolemia, menggunakan teknik imunohistokimia. Distribusi dan frekuensi sel-sel penghasil Cu, Zn-SOD pada jaringan tersebut mencerminkan jumlah dan kandungan Cu,Zn-SOD. Sejumlah 30 ekor tikus (galur Wistar) dengan berat 200±5 gr telah digunakan pada penelitian ini. Tikus tersebut dikelompokkan menjadi dua kelompok perlakuan, yaitu : (1) kelompok kontrol dan (2) kelompok hiperkolesterolemia. Kelompok hiperkolesterolemia diberi perlakuan dengan pakan berkadar kolesterol 1% selama 2 bulan, sedangkan kelompok kontrol diberi pakan dengan ransum standar. Pengukuran kolesterol darah dilakukan sebelum dan sesudah perlakuan. Setelah jaringan hati dan ginjal disampling, diakhir perlakuan, dilakukan serangkaian pemrosesan standar jaringan dengan metode embedding paraffin. Setelah dipotong dengan mikrotom, jaringan hati dan ginjal diwarnai dengan pewarnaan imunohistokimia terhadap Cu,Zn-SOD. Pengamatan dilakukan secara kualitatif pada inti dan sitoplasma sel hati maupun sel-sel pada ginjal bagian korteks dan medulla. Pengamatan juga dilakukan secara kuantitatif pada inti sel hati dan inti sel tubuli renalis berdasarkan intensitas warna yang terbentuk pada berbagai tingkat kandungan Cu,Zn-SOD.