Increasing Antagonist Ability of Ralstonia pickettii to Rhizoctonia solani Use Transposon Mutagenesis Methods

Abstract

Rice (Oryza sativa Linn.) is important food crop in Indonesia, but the production levels are still fluctuated. Pests and diseases are one of the main problems in rice cultivation. Rice sheath blights (RSB) disease caused by Rhizoctonia solani, is one of important disease in rice cultivation. Now, Ralstonia pickettii can be used as biocontrol agent of RSB. The objective of this study is to improve the potential of R. pickettii as biocontrol agent of R. solani by transposon mutagenesis pUT mini-Tn5Km1. The transposon mutagenesis pUT mini-Tn5Km1 is one of technology for mutagenesis to construct microorganisms that have more power than wild type microorganisms. Insertion of transposon mutagenesis expressed different morphological changes transconjugant bacteria than wild type R. pickettii. Morphological changes are includes changes in color, form, edge, and elevation of colony. There are about 10 transconjugants R. pickettii had exceeded the percentages inhibition of R. pickettii wild type, ranged from 7.51% up to 62.32%. Rpm 38 was the highest percentages of inhibition about 62.32%. Confirmation of insertion Tn5Km1 sequence to the chromosome of transconjugants R. pickettii had not been proven by regular PCR.

Padi (Oryza sativa Linn.) merupakan tanaman pangan penting di Indonesia, tetapi tingkat produksinya terus mengalami fluktuatif. Saat ini, hama dan penyakit menjadi permasalahan utama pada pertanaman padi. Hawar pelepah padi adalah penyakit yang disebabkan oleh Rhizoctonia solani, yang merupakan salah satu penyakit penting pada pertanaman padi. Ralstonia pickettii dapat digunakan sebagai agen hayati dari penyakit hawar pelepah padi saat ini. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk meningkatkan potensial dari R. pickettii sebagai agen hayati dari R. solani dengan menggunakan metode transposon mutagenesis pUT Mini-Tn5Km1. Transposon mutagenesis pUT Mini-Tn5Km1 merupakan salah satu teknologi dari mutagenesis untuk membentuk mikroorganisme yang memiliki kekuatan melebihi mikroorganisme tipe liarnya. Penyisipan transposon mutagenesis ini mengekspresikan perbedaan perubahan bentuk dari bakteri transkonjugan jika dibandingkan dengan R. pickettii tipe liar. Perubahan bentuk ini meliputi perubahan pada warna, bentuk, tepian, dan elevasi koloni. Ada sekitar 10 transkonjugan R. pickettii melebihi kemampuan persentase penghambatan dari R. pickettii tipe liar, berkisar antara 7.51% hingga 62.32%. RPM 38 memiliki persentase penghambatan tertinggi sekitar 62.32%. Konfirmasi penyisipan sekuens Tn5Km1 pada genom transkonjugan R. pickettii belum dapat dibuktikan menggunakan PCR reguler.