Transformasi Plasmid Ekspresi Pembawa Gen Penyandi Antibodi Anti-EGFR ke dalam Escherichia coli dan Komagataella phaffii

Abstract

Panitumumab bentuk penuh masih menjadi unggulan dalam terapi kanker yang menargetkan EGFR. Di sisi lain, proses produksinya cukup sulit karena memerlukan dua transkrip gen dan sel mamalia sebagai inangnya. Dalam upaya mempermudah proses produksinya, telah dilakukan desain plasmid ekspresi berisi konstruk gen penyandi antibodi baru berbentuk scFv-Fc dengan panitumumab sebagai acuannya. Riset ini bertujuan mentransformasikan plasmid tersebut ke dalam E. coli dengan kejut panas dan K. phaffii dengan elektroporasi, yang berperan sebagai agen perbanyakan plasmid dan agen pengekspresi protein. Transformasi berjalan dengan baik hingga didapat transforman E. coli dan K. phaffii (putatif) yang membawa plasmid tersebut dengan efisiensinya masing-masing sebesar (3.444±0.489)×10³ and (1.90±0.466)×10² CFU/µg. Transforman E. coli berhasil memperbanyak plasmid dengan kuantitas konsentrasi yang tinggi, namun rasio A260/230 yang terkuantifikasi cukup tinggi. Diperlukan analisis lanjutan, seperti PCR koloni dan SDS-PAGE, untuk mengonfirmasi transforman K. phaffii positif asli.