Ekspresi Fusi Transkripsi dan Fusi Translasi pucß'-hemT pada Rhodobacter sphaeroides 2.4.1

Abstract

Rhodobacter sphaeroides 2.4.1 adalah bakteri fotosintetik fakultatif anoksigenik yang menggunakan asam &-aminolevulinat sebagai prekurso, pada lintasan umum pembentukan tetrapirol. Asam&-amino-levulinat dibentuk pada R. sphaeroides lewat kondensasi glisin dan suksinil koenzim A oleh enzim ALA sintase (succinyl-CoA: glycine C-succinyl transferase [decarboxylating], EC 2.3.1.37). Pada R. sphae-roides, ALA sintase terdapat sebagai dua isozim yang disandikan oleh gen hema dan hemt. Fusi pucB-hem? adalah fusi hemT dengan fragmen pucB yang merupakan promotor dari operon puc, yitu operon yang menyandikan polipeptida penyusun kompleks antena pemanen cahaya B800-850(LHII). Pada fusi translasi, hemT dan fragmen puc akan ditranskripsikan dan ditranslasikan secara bersama membentuk suatu fusi protein, pada fusi transkripsi, akan dihasilkan polipeptida yang terpisah. Ekspresi fusi transkripsi dan fusi translasi pucB'-hemt diasumsikan akan meningkatkan aktivitas ALA sintase pada Rhodobacter sphaeroides 2.4.1. Analisa pertumbuhan terhadap R. sphaeroides 2.4.1 yang membawa plasmid PAS607A (membawa fusi translasi pucß'-hemT) dan plasmid pAS805 (membawa fusi transkripsi pucB'-hemT) menghasilkan pola kurva pertumbuhan yang tidak berbeda terhadap pola kurva pertumbuhan R. sphaeroides 2.4.1 (pRK415) yang merupakan kontrol tipe liar, selanjutnya asai terhadap ALA ekstraseluler yang dihasilkan selama pertumbuhan menunjukkan tidak adanya perbedaan nyata terhadap pola kurva produksi ALA ekstraseluler yang dihasilkan oleh tiap galur bakteri terhadap kontrol tipe liar, tidak adanya perbedaan ini mungkin disebabkan oleh adanya suatu mekanisme regulasi pada tingkat pasca-translasi yang memodulasi ekspresi hemt pada R. sphaeroides 2.4.1.