Produksi dan Purifikasi Enzim Protease Alkali Dari Bakteri Halofilik Staphylococcus hominis Asal Selat Bali

Abstract

Permintaan terhadap produk pembersih ramah lingkungan mendorong pengembangan biodetergen berbasis enzim, khususnya protease alkali yang aktif pada kondisi ekstrem seperti pH dan salinitas tinggi. Staphylococcus hominis yang diisolasi dari spons laut di Selat Bali menunjukkan potensi sebagai penghasil protease alkali. Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi produksi dan pemurnian protease alkali dari isolat tersebut. Skrining aktivitas proteolitik dilakukan menggunakan media Skim Milk Agar pH 8, dilanjutkan dengan produksi enzim dalam Zobell Marine Broth ditambah NaCl 10%. Ekstrak enzim dimurnikan melalui fraksinasi amonium sulfat 40%, diikuti dua tahap Ion Exchange Chromatography (IEC) menggunakan kolom 1 mL dan 5 mL, serta Size Exclusion Chromatography (SEC). Aktivitas protease diuji dengan metode Sigma’s non-specific menggunakan substrat kasein, kadar protein ditentukan dengan metode BCA, dan kemurnian dianalisis melalui SDS-PAGE. Proses pemurnian menunjukkan peningkatan bertahap aktivitas spesifik dari 0,265 U/mg pada ekstrak kasar menjadi 0,435 U/mg pada fraksi hasil SEC, dengan kemurnian relatif tertinggi sebesar 1,64 kali. SDS-PAGE menunjukkan pita tunggal dominan berukuran ±44 kDa pada fraksi SEC (elusi 19–22), mengindikasikan keberhasilan pemisahan enzim dari kontaminan. Hasil ini menunjukkan protease alkali dari S. hominis memiliki potensi besar untuk dikembangkan sebagai komponen aktif dalam biodetergen ramah lingkungan yang menuntut kestabilan dan aktivitas tinggi pada kondisi ekstrem.