Skrining Mikroba Penghasil Transglutaminase (MTGase) dari Isolat Actinobacteria Laut asal Laut Flores

Abstract

Mikroba transglutaminase (MTGase) merupakan enzim yang banyak dimanfaatkan dalam industri pengolahan pangan karena memiliki keunggulan dibanding transglutaminase dari sumber lain. Salah satu mikroba yang potensial menghasilkan MTGase adalah Actinobacteria. Penapisan bakteri penghasil MTGase dari isolat Actinobacteria laut asal Laut Flores dilakukan untuk memperoleh isolat yang potensial menghasilkan MTGase. Penapisan Actinobacteria penghasil MTGase berdasarkan uji filter paper disk (FPD) yang dilanjutkan dengan penapisan gen pengkode transglutaminase dengan metode Polymerase Chain Reaction (PCR). Hasil positif dari uji FPD didapat dengan mengamati perubahan warna pada paper disk menjadi kecokelatan, dimana 10 dari 110 isolat positif MTGase. Uji PCR dilakukan dengan amplikasi gen pengkode MTGase dengan menggunakan primer forward PTGase4 dan primer reverse PTGase5. Hasil positif ditunjukkan dengan munculnya pita positif gen pengkode MTGase pada ~400bp, dimana dari 9 dari 10 isolat memiliki gen pengkode MTGase. Sekuens gen parsial TGase pada salah satu isolat Actinobacteria, yaitu MAF23-24 menunjukkan adanya domain konservasi transglutaminase dan sebagian besar basa nukleotida yang lestari pada gen TGase dari genbank.