Deteksi secara imunohistokimia antioksidan copper, zinc-superoxide dismutase (Cu, Zn-SOD) pada hati tikus yang diberi pakan dengan kadar kolesterol tinggi

Abstract

Penelitian ini dilakukan dengan tujuan untuk melihat perubahan kandungan enzim antioksidan Cu, Zn-SOD secara imunohistokimia pada hati tikus yang diberi pakan dengan kadar kolesterol tinggi (hiperkolesterolemia). Sebanyak enam ekor tikus jantan galur Sprague Dawley (256-275 gram) telah digunakan. Hewan percobaan dibagi menjadi dua kelompok. Kelompok pertama adalah kelompok kontrol (C) dan kelompok kedua adalah kelompok perlakuan (hiperkolesterolemia). Setelah tikus dibunuh secara dislokasio Os Cervicalis organ hati segera diambil dan difiksasi. Serangkaian proses histologi dilakukan pada jaringan. Kemudian dilakukan pewarnaan Hematoxylin Eosin (HE) dan imunohistokimia. Pewarnaan HE dilakukan dengan tujuan melihat morfologi umum dari jaringan hati tikus. Sedangkan pewarnaan imunohistokimia terhadap SOD dilakukan dengan tujuan untuk melihat perubahan kandungan SOD pada organ hati. Pengamatan dilakukan dengan membandingkan kelompok kontrol dan kelompok perlakuan secara kualitatif pada sitoplasma dan secara kuantitatif pada inti sel hati tikus. Hasil pengamatan diberi standar penilaian berdasarkan intensitas warna dan reaksi yang terjadi pada pewarnaan secara imunohistokimia. Hasil pengamatan secara kualitatif menunjukkan penurunan kandungan Cu, Zn- SOD pada kelompok perlakuan dibandingkan kelompok kontrol. Hasil ini diperkuat dengan hasil pengamatan secara kuantitatif. Pada kelompok kontrol kandungan Cu, Zn- SOD dengan intensitas kuat ditemukan sebanyak 46,88% dari rata-rata total jumlah inti sel per lapang pandang. Sedangkan pada kelompok hiperkolesterolemia kandungan Cu, Zn-SOD dengan intensitas kuat didapatkan hasil sebesar 12,85% dari rata-rata total jumlah inti sel per lapang pandang. Dari hasil pengamatan pada pewarnaan HE ditemukan perubahan morfologi pada kelompok perlakuan berupa perluasan sinusoid, infiltrasi sel radang dan kerusakan sel. Dari hasil penelitian ini dapat ditarik kesimpulan bahwa pada kondisi hiperkolesterolemia mengakibatkan terjadinya penurunan kandungan Cu, Zn-SOD dan kerusakan sel hati tikus putih jantan galur Sprague Dawley….