Mutagenesis EMS dan Transposon pada Xanthomonas campestris pv. glycines VR 32 dalam upaya memperoleh galur non patogenik

Abstract

Penyakit bisul bakteri yang disebabkan oleh Kanthomonas campestris pv. glycines merupakan salah satu penyakit bakterial penting pada tanaman kedelai di Indonesia. Sampai saat ini mekanisme patogenisitas bakteri ini belum diketahui secara pasti. Untuk mempelajari gen-gen yang terlibat dalam pembentukan bisul bakteri, perlu dicari galur non patogenik baik secara alamiah maupun melalui mutagenesis. Dalam penelitian ini dilakukan mutagenesis kimiawi dengan menggunakan ethyl metanesulfonate (EMS) dan mutagenesis hayati dengan menggunakan transposon Tn 5. Patogenisitas suatu bakteri dapat disebabkan oleh banyak faktor, antara lain enzim, toksin, eksopolisakarida, lipopolisakarida dan lain-lain. Tiga faktor yang dianalisis pada mutan hasil mutagenesis ini adalah keberadaan kapsul, enzim protease dan enzim katalase. Sedangkan tingkat patogenisitas dari mutan-mutan tersebut diuji dengan menggunakan teknik bioasai kotiledon. Melalui mutagenesis tranposon diperoleh mutan yang bersifat non patogenik yaitu mutan nomor 715. Mutan ini menunjukkan hasil positif untuk uji kapsul, uji protease dan uji katalase. Selain itu juga diperoleh mutan-mutan yang menurun tingkat patogenisitasnya yaitu sebanyak 9 mutan dari mutasi dengan transposon dan 7 mutan dari mutasi dengan EMS. Seluruh mutan ini menunjukkan hasil positif untuk ketiga uji yang dilakukan. Walaupun semua analisis mutan memberikan hasil positif namun bukan berarti ketiga faktor tersebut yaitu kapsul, protease dan katalase tidak ikut terlibat dalam mekanisme patogenisitas. Karena kemungkinan patogenisitas bakteri Xanthomonas campestris pv. glycines disandikan oleh banyak gen yang bekerjanya saling bergantung.