Potensi Bacillus sp. dari bekuan lateks Hevea brasiliensis sebagai penghasil protease

Abstract

Dewasa ini semakin berkembang aplikasi bioteknologi modern berupa penggunaan enzim sebagai biokatalis untuk berbagai industri pangan dan non pangan, diantaranya adalah protease. Enzim ini dapat diproduksi oleh hewan, tumbuhan, dan mikroorganisme. Mikroba merupakan penghasil protease yang paling potensial karena sumbernya beragam, dapat direkayasa secara genetika, ongkos produksi lebih murah, dan produksi enzimnya cepat. Produksi protease tidak akan optimum bila kondisi pertumbuhannya tidak sesuai sehingga perlu dilakukan optimasi produksi. Karakter protease juga perlu diketahui agar dapat diaplikasikan secara maksimum. Dalam penelitian ini dipelajari pengaruh waktu pertumbuhan dan pH media terhadap aktivitas protease Bacillus sp. asal lateks (B.sp. lateks) serta B. subtilis L, B. megaterium, dan B. licheniformis sebagai pembanding pada media cair LBC 0,5 % serta pengaruh waktu pertumbuhan terhadap indeks proteolitik (IP) pada media padat SMA 5 %. Selanjutnya protease dikarakterisasi, yaitu diperkirakan bobot molekulnya (BM) dengan elektroforesis SDS-PAGE. Aktivitas enzim dianalisis secara spektrofotometri pada panjang gelombang 578 nm dengan pereaksi folin ciacelteu, sedangkan IP dianalisis dengan membandingkan diameter zona bening terhadap diameter koloni. Kondisi optimum produksi protease oleh B.sp. lateks adalah 6 hari dengan pH media 8,27. B. subtilis L dan B. megaterium mencapai produksi protease optimum pada hari ke-5 dengan pH media berturut- turut 8,16 dan 8,06, sedangkan B. licheniformis waktu optimumnya 2 hari dengan pH media 7,53. Bila dihubungkan dengan nilai IP, aktivitas tertinggi tidak selalu dicapai pada saat IP tertinggi. B.sp. lateks dan B. subtilis L mencapai IP tertinggi pada hari ke-4, yaitu sebesar 3,260 dan 3,060. IP tertinggi dari B. megaterium dan B. licheniformis dicapai pada hari ke-5 dan ke-6 masing-masing 1,871 dan 2,500. Bacillus sp. mensekresikan protease dengan jumlah pita dan BM yang berbeda-beda. B.sp lateks. memproduksi dua jenis protease dengan BM 28,7 kD dan 19,3 kD. B. subtilis L mengeluarkan 5 jenis protease dengan BM 50,4 kD, 42,3 kD, 33,3 kD, 18,4 kD, dan 10,5 kD, sedangkan B. megaterium dan B. licheniformis menghasilkan satu jenis protease dengan BM keduanya 58,5 kD.