Karakterisasi Lipase dan Kloning Gen α/β Hidrolase dari Acinetobacter junii Asal Tanah Terkontaminasi Oli Bekas Kendaraan Bermotor

Abstract

Lipase merupakan enzim yang dapat mengkatalisis proses hidrolisis senyawa trigliserida menjadi asam lemak dan gliserol. Pemanfaatan lipase sudah banyak digunakan dalam produksi skala industri, terutama lipase yang bersumber dari mikrob. Lipase mikrob memiliki aktivitas katalitik unik, mudah dimanipulasi genetik, dan murah. Tujuan penelitian ini adalah mengkarakterisasi lipase dan kloning gen α/β hidrolase dari Acinetobacter junii yang diisolasi dari tanah terkontaminasi oli bekas kendaraan bermotor. Karakterisasi dilakukan menggunakan metode pNP-ester dan kloning menggunakan vektor pGEM-T Easy. Hasil karakterisasi menunjukkan lipase A. junii memiliki suhu dan pH optimum berurutan yaitu 50⁰C dan 8.5. Substrat spesifik lipase bakteri ini adalah heksanoat dan dapat ditingkatkan aktivitasnya dengan penambahan CaCl2 dan menggunakan pelarut n-heksana. Keberhasilan gen α/β hidrolase diklon juga mendukung bahwa lipase A. junii berpotensi untuk diaplikasikan skala industri.