Introduksi Gen Penyandi AHL-Laktonase (aiiA) Bacillus cereus INT1c ke dalam Agrobacterium tumefaciens AGL 1.

Abstract

Bakteri menggunakan mekanisme quorum sensing (QS) dalam berkoordinasi untuk melakukan suatu proses tertentu melalui perantara molekul sinyal asil homoserin lakton (AHL). Bakteri fitopatogen umumnya menggunakan mekanisme QS untuk mengekspresikan gen virulen pada saat menginfeksi tanaman. Penghambatan ekspresi gen virulen tersebut dapat dilakukan dengan mendegradasi senyawa AHL menggunakan AHL-laktonase. AHL-laktonase merupakan kelompok enzim yang berfungsi untuk menghidrolisis cincin lakton pada molekul AHL. Enzim ini umumnya ditemukan pada kelompok Bacillus spp. dan disandikan oleh gen aiiA. Penelitian ini bertujuan mengintroduksi gen penyandi AHL-Laktonase (aiiA) dari isolat Bacillus cereus INT1c dalam E.coli DH5α transforman ke dalam Agrobacterium tumefaciens AGL 1. Gen aiiA dari isolat Bacillus cereus INT1c dalam E.coli DH5α rekombinan berhasil diintroduksikan ke dalam sel A. tumefaciens AGL 1 melalui plasmid vektor pCambia 2300. Pemotongan plasmid rekombinan dengan menggunakan enzim Nco I dan Bgl II menunjukkan adanya fragmen DNA berukuran 8743 pb (pCambia 2300) dan 800 pb (gen aiiA) pada gel agarosa 1.0%. Hasil ini membuktikan bahwa plasmid rekombinan berhasil diintroduksikan dan telah diperbanyak di dalam sel A. tumefaciens AGL 1 transforman.