Introduksi Gen Penyandi AHL Laktonase Asal Bacillus thuringensis SGT3g ke dalam Agrobacterium tumefaciens LBA4404.

Abstract

Bakteri memanfaatkan quorum sensing (QS) untuk regulasi biofilm, faktor virulen, sintesis antibiotik, sporulasi, dan bioluminesen. Salah satu prinsip pengendalian virulensi bakteri fitopatogen dengan dasar QS adalah mencegah akumulasi AHL dengan mendegradasi molekul sinyal tersebut. Salah satu enzim pendegradasi AHL adalah enzim Acyl Homoserine Lactonase. AHL-laktonase sebagai salah satu enzim anti-QS dapat digunakan sebagai alternatif dalam pengendalian bakteri fitopatogen. Enzim ini umumnya ditemukan pada kelompok Bacillus dan disandikan oleh gen aiiA. Penelitian ini bertujuan untuk mengintroduksi gen penyandi AHL Laktonase pada Agrobacterium tumefaciens LBA4404 asal Bacillus thuringensis SGT3g. Amplifikasi gen AHL-laktonase dari isolat E.coli rekombinan yang membawa gen aiiA dari Bacillus thuringensis SGT3g dengan menggunakan primer aiiA mendapatkan pita DNA berukuran 800 bp. Gen aiiA asal Bacillus thuringensis SGT3g disisipkan ke dalam plasmid pCambia 2300 pada situs restriksi NcoI dan BglII. Analisa elektroforesis hasil restriksi pCambia 2300 rekombinan, plasmid pC-TE01, menggunakan enzim restriksi NcoI dan BglII menunjukkan adanya fragmen DNA berukuran 8743 bp (pCambia 2300) dan 800 bp (DNA sisipan aiiA) pada gel agarosa 1,5%.