Kloning DNA Penyandi Enzim-Enzim Hidrolitik dari Tanah Kawah Gunung Kamojang

Abstract

Enzim golongan hidrolase merupakan kelompok enzim yang banyak digunakan dalam bidang industri, pangan dan kesehatan. Sebagian besar enzimenzim ini diproduksi dari mikroorganisme terutama bakteri. Melihat akan kebutuhan yang semakin meningkat maka sangat perlu adanya usaha untuk mengimbangi kebutuhan tersebut. Salah satu cara untuk peningkatan produksi yaitu aplikasi teknologi kloning. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi langsung DNA total dari tanah Kawah Gunung Kamojang dan mengklon DNA hasil isolasi serta memilah ekspresi enzim-enzim hidrolitik. Isolasi DNA total dari tanah menggunakan larutan lisis pH8.0 (NaCl 0.05 M, Na2EDTA 0.01 M dan Tris-HC1 0.05 M) yang mengandung lisozim 20 mg/ml dan 10% SDS. DNA diendapkan dengan isopropanol. Vektor yang digunakan adalah plasmid pUC19 yang diisolasi menggunakan TELT dan 10% SDS sebagai larutan lisis kemudian pelet diendapkan dengan ethanol absolut dan 0.1 Natrium Asetat 3 M.