Karakterisasi Enzim Protease Fibrinolitik Termostabil dari Ekstrak Kasar Cacing Tanah Lumbricus rubellus Strain Lokal

Abstract

Tepung cacing Lumbricus rubellus (2%) dilarutkan dalam 50 mM bufer fosfat pH 7,0, kemudian disentrifusa pada kecepatan 6000 G dan suhu 4°C selama 10 menit. Dari hasil sentrifusa didapatkan ekstrak kasar enzim, kemudian dilakukan analisis aktivitas enzim maksimum dengan memanaskan ekstrak pada selang suhu 50-80°C dan selang waktu 5-20 menit. Hasil analisis aktivitas enzim maksimum didapatkan pada suhu 65°C 10 menit sebesar 3,895 U/ml dengan aktivitas spesifik enzim 4,687 U/mg, kemudian digunakan untuk karakterisasi selanjutnya secara kuantitatif (pengaruh suhu, pH, inhibitor, dan sodium dodecyl sulphate-polyacrilamide gel elctrophoresis/ SDS-PAGE) dan kualitatif (zimogram). Protease cacing tanah L. rubellus terdiri atas tujuh pita proteolitik dengan pemanasan atau tanpa pemanasan dengan ukuran bobot molekul 12,64; 15,49; 18,97; 22,57; 30,16; 35,89; dan 42,70 kD (dengan pemanasan) dan 11,93; 17, 39; 18,97; 22,57; 30,16; 33,87; dan 42,70 kD (tanpa pemanasan). Enzim memiliki suhu optimum 65°C dan pH optimum 11, serta termasuk dalam kelompok protease serin karena dihambat sempurna oleh PMSF pada konsentgrasi total 1 mM. Ekstrak kasar enzim protease dari cacing tanah L. rubellus memiliki aktivitas fibrinolitik yang potensial dan termostabilitas tinggi dari analisis zimogram fibrin.