Karakterisasi Aktivitas Enzim Lipase Bakteri Bacillus amyloliquefaciens SLBD dari Feses Kuda

Abstract

Lipase merupakan enzim yang berperan dalam menghidrolisis ikatan ester pada lipid dan dapat dihasilkan oleh berbagai jenis mikroorganisme, termasuk bakteri Bacillus amyloliquefaciens SLBD (Ba-SLBD) yang diisolasi dari feses kuda. Penelitian ini bertujuan mengonfirmasi sekaligus mengkarakterisasi aktivitas lipase (lipolitik) Ba-SLBD. Fraksi ekstraseluler Ba-SLBD diperoleh melalui pemanenan pada tiga fase pertumbuhan berbeda menggunakan media Luria Bertani (LB) broth pada suhu 37 °C. Fase pertumbuhan tersebut meliputi fase adaptasi (EF1) = 10 jam, fase logaritmik (EF2) 10–54 jam, dan fase stasioner (EF3) 54–63 jam. Konsentrasi protein tertinggi (P<0,05) terdeteksi pada fraksi EF2 dibandingkan dengan EF1 dan EF3. Aktivitas lipase masing-masing fraksi diuji menggunakan metode uji cawan dengan Tween 80 sebagai substrat. Indikator degradasi substrat ditunjukkan oleh terbentuknya endapan di sekitar area sampel. Aktivitas tertinggi terdeteksi pada fraksi EF2 setelah inkubasi selama 24 jam (42,36 ± 2,32 mm) dan 36 jam (44,62 ± 3,53 mm). Pengamatan aktivitas lipase EF2 pada berbagai variasi pH dan suhu menunjukkan kondisi optimum pada pH 7,0 dan suhu 37 °C.

Lipase is an enzyme involved in the hydrolysis of ester bonds in lipids and can be produced by various types of microorganisms, including Bacillus amyloliquefaciens SLBD (Ba-SLBD), isolated from horse feces. This study aimed to confirm and characterize the lipolytic activity of Ba-SLBD. The extracellular fraction of Ba-SLBD was harvested at three different growth phases in Luria Bertani (LB) broth at 37 °C. These phases included the early phase (EF1) = 10 jam, logarithmic phase (EF2) 10–54 hours, and stationary phase (EF3) 54–63 hours. The highest protein concentration (P<0.05) was detected in EF2 compared to EF1 and EF3. Lipase activity of each fraction was tested using an agar plate method with Tween 80 as the substrate. Observations showed a significant interactive effect between the growth phase and incubation time on lipase activity (P<0.01). The highest activity was found in EF2 after 24 hours (42.36 ± 2.32 mm) and 36 hours (44.62 ± 3.53 mm) of incubation. Further analysis of EF2 lipase activity under different pH and temperature conditions revealed optimal activity at pH 7.0 and 37 °C.